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2021
07-13

葡萄糖氧化酶測試盒樣品的制備與測定
葡萄糖氧化酶廣泛存在于動物、和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并產生H2O2，是生物體中產生活性氧的代謝途徑之一。葡萄糖氧化酶測試盒具有質量可靠、*、效果精定、靈教度高、操作簡單、易保存等特點。試劑的組成配制：提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體19.2mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體4mL×1瓶，4℃保存；試劑三：液體1mL×1支，4℃保存；樣品測定的準備：組織處理：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進
2021
07-08

丙酮酸脫氫酶活性檢測試劑盒的檢測步驟
丙酮酸脫氫酶是一種催化丙酮酸脫羧反應的多酶復合體，有三種酶和六種輔助因子參與化學反應。分別是丙酮酸脫氫酶，二氫硫辛酰胺轉乙酰酶，二氫硫辛酸脫氫酶。丙酮酸脫氫酶(PDH)是一種線粒體酶,可以催化丙酮酸鹽向乙酰輔酶A和CO2的轉化,同時還是聯系三羧酸(TCA)和糖酵解的媒介。該酶受到磷酸化作用的抑制,可在脫磷酸作用下激活。PDH的突變還與丙酮酸脫氫酶的效率（產生乳酸和神經機能障礙）和亞急性壞死性腦脊髓病有關。通過酶促分析,可以測定丙酮酸脫氫酶的活性,該反應會產生與所含的酶活性成正比的比色(450nm
2021
06-11

避免失活，生物試劑存放運輸過程中的注意事項
生物試劑是指有關生命科學研究的生物材料或有機化合物，以及臨床診斷、醫學研究用的試劑。主要包括：電泳試劑、色譜試劑、離心分離試劑、免疫試劑、標記試劑、組織化學試劑、透變劑和致癌物質等等。試劑的存放一直是被忽略的一個問題，由于生物制品由蛋白質、脂肪、糖和核酸組成，在保存過程中必須防止失活。生物試劑的存放與運輸注意事項：1、干冰是固體二氧化碳，溫度為零下78℃，濕冰就是冰的溫度，一般為冷凍條件的溫度，如在零下20℃冷凍的冰的溫度為零下20℃。對于一些酶類等蛋白產品，需要干冰運輸，其他大多數生化試劑采用
2021
06-03

關于WB實驗中蛋白樣品制備的常見問題分析
WB實驗又稱免疫印跡實驗，是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術，具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現已成為蛋白分析的一種常規技術。對于一直都在做蛋白研究的你，在樣品制備中的小細節你都了解嗎？這里為大家整理了蛋白樣品制備中大大小小的常見問題，一起來學習吧！1、所有WB實驗都用總蛋白就可以完成嗎？當然不是，要根據WB的實驗目的來確定提取哪類蛋白，如需驗證某些低豐度蛋白，或蛋白定位
2021
05-13

關于核酸變性預制膠的操作步驟，你了解多少？
核酸變性預制膠在分離片段DNA分子時效果很好，分辨率很高，甚至相差1bp的DNA的片段都能分開，一個標準點樣孔中可以容納相對大量的DNA。所以常被用于蛋白印跡實驗、遺傳圖譜構建、數量形狀基因定位、標記輔助選擇等生物多樣性研究等。核酸變性預制膠的操作步驟：一、非變性預制膠：1、準備樣品：將樣品和loadingbuffer（5×）按照4：1混合均勻。2、準備1×runningbuffer：取200ml的5×TBEbuffer，加入去離子水至1L，制備成1×TBEbuffer。3、將預制膠裝入兼容的電
2021
05-11

教你成為平淡無奇的WB小能手-結尾篇
大家好，小編又又又來了。今天是WB最后一步了，抗體孵育到顯影過程。01一抗孵育◆封閉結束前20min準備和所需一抗數量相等的孵育盒，在孵育盒上用記號筆標注出抗體編號及所需稀釋比。按照規定的稀釋比例進行抗體稀釋。稀釋比例建議預實驗提前摸索或者根據抗體說明書上建議。◆封閉時間結束之后，倒掉封閉液，將稀釋好的抗體加入到槽內，將搖床放入4℃展示柜孵育過夜。◆第二天將搖床搬出，平衡室溫搖15min，倒掉一抗工作液，加入5mLTBST潤洗膜一次，倒掉，加新的TBST洗膜5min，倒掉TBST，重復5次，此過
2021
05-07

Elisa檢測試劑盒的顯色液A和B有什么作用？
Elisa檢測試劑盒具有敏感性高、特異性強、操作簡單等優點,被廣泛應用于各種抗原和抗體的測定,為輔助臨床診斷與生物科研起到了積的作用。Elisa檢測試劑盒檢測中顯色液A和B有什么作用？酶聯免疫診斷試劑盒的底物A就是顯色劑A（含過氧化氫）為供氫體（DH2）,底物B就是顯色劑B（含TMB）,用于顯色。另外，常用的底物還有：AP的底物，常用的為對-硝基苯磷酸脂（PNP），其反應物為黃色的對硝基酚，測讀波長為405nm2）GOD的底物，為葡萄糖，供氫體為對硝基藍四氮唑，反應產物為不溶性的藍色沉淀。什么是
2021
03-26

土壤中性磷酸酶測試盒的測定意義是什么？
土壤中性磷酸酶測試盒實驗效果好，具有靈敏度高，快速、準確、操作簡單、易于保存等優點。測定意義：土壤磷酸酶是催化土壤有機磷化合物礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉化及其生物有效性，是評價土壤磷素生物轉化方向與強度的指標。磷酸酶活性受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH的影響，根據最適PH范圍，一般把土壤磷酸酶分為中性、酸性和堿性三種類型。土壤中性磷酸酶(S-NP)測試盒測定原理:中性環境中，S-NP催化磷酸苯一鈉水解牛成和磷酸氫一鈉，誦討測定酚的牛成量即可計算出NP活性。注意事項：
2021
03-25

赫斯特熒光染料為細胞多色成像提功有效方法
赫斯特熒光染料是親脂性熒光染料家族成員之一，它可以用來標記細胞膜和其它脂溶性生物結構。當熒光染料與細胞膜結合后，其熒光強度大大增強。隨著生命科學的發展及熒光影像技術的不斷突破，基于熒光染料的分析手段在生物分子標記領域、藥物篩選、外科手術指導甚至癌癥的診斷及治療等領域也發揮著越來越重要的作用。熒光染料的兩個18-碳鏈插入到細胞膜，從而進行特定的、穩定的細胞染色，幾乎不會發生細胞間的染料轉移。赫斯特熒光染料熒光染料和其他細胞膜熒光染料如橙色熒光，綠色熒光紅色熒光配合使用，為多色成像和流式細胞分析提供
2021
03-23

小鼠白細胞介素-1β試劑盒使用時需要做什么處理？
小鼠白細胞介素-1β試劑盒用于測定小鼠血清及相關液體樣本中白細胞介素1β（IL-1β）含量。小鼠白細胞介素-1β試劑盒使用時的樣本應做好如下處理：1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4C過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20'C或-80C保存，但應避免反復凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2-8C1000g離心20分鐘，或將標本放于-20C或-80C保存，但應避免反復凍融。3.組織勻漿:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4中洗組
2021
03-19

實驗室耗材Parafilm封口膜的物理性質及注意事項說明
實驗室耗材Parafilm封口膜在實驗室隨處可見，幾乎每一個科室都是一大卷封口膜。封口膜具有柔軟性，可塑性，防止水分流失，自動密封性，無味，容易切割，熱塑性塑料，半透明，無色等特點，可以快速有效地密封實驗器皿。一、Parafilm封口膜的物理性質：1、實驗室耗材Parafilm封口膜是半透明的，有柔性的，熱塑性塑料，高性能防水材料，本身為無色，無嗅，無味，厚度僅0.005″(0.127mm)。2、封口膜的特性使它適用于許多重要實驗和技術方面的理想工具，它緊緊而且自動密閉的形成在試管，*瓶，各種不
2021
03-12

酸性轉化酶活性計算說明
蔗糖轉化酶（Invertase，Ivr）催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代謝關鍵酶之一。根據*適pH，將高等植物Ivr分為酸性轉化酶（AI）和中性轉化酶（NI）兩種類型。AI主要存在于細胞液泡或自由空間中，*適pH為4.5~5.0（酸性），通過降解液泡中蔗糖，調節液泡中蔗糖的利用和果實內糖類的積累。AI催化蔗糖降解產生還原糖，進一步與3,5－二硝基水楊酸反應，生成棕紅色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范圍內510nm光吸收增加速率與AI活性成正比。酸性轉化酶（AI）
2021
03-02

過氧化氫測定盒的檢測原理介紹
過氧化氫是除水外的另一種氫的氧化物，粘性比水稍高，化學性質不穩定。純過氧化氫是淡藍色的黏稠液體，可任意比例與水混溶，是一種強氧化劑。其一般以30%或60%的水溶液形式存放，俗稱雙氧水，為無色透明液體，適用于醫用傷口消毒、環境消毒和食品消毒。H2O2是生物體內常見的活性氧分子，主要由SOD和XOD等催化產生，由CAT和POD等催化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互轉化的樞紐。一方面，H2O2可以直接或間接地氧化細胞內核酸，蛋白質等生物大分子，并使細胞膜遭受損害，從而加速細胞的衰老
2021
02-22

四環素類抗生素的化學性質來了解下
四環素類抗生素屬于快速抑菌劑，能快速抑制細菌的生長，是由放線菌產生的一類廣譜抗生素，包括金霉素、土霉素、四環素及半合成衍生物甲烯土霉素、強力霉素等，其結構均含并四苯基本骨架。四環素類抗生素的化學性質有：1.酸性條件下不穩定：C-6羥基和C-5α上的氫正好處于反式構型易發生消除反應，生成無活性橙黃色脫水物。在pH2～6條件下C-4位二甲氨基很易發生可逆反應的差向異構化。2.堿性條件下不穩定：在堿性條件下生成具有內酯結構的異構體。3.和金屬離子的反應：在近中性條件下能與多種金屬離子形成不溶性螯合物。
2021
02-05

教你成為平淡無奇的WB實驗小能手—常見問題篇
Weaternblot原理蛋白質印跡（WesternBlot，WB）又稱為免疫印跡（Immunoblot），其是利用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）將樣品中分子量大小不同的蛋白分開，然后通過電轉移的方法將凝膠中的蛋白幾乎原位、定量地遷移、固定到固相膜上，再利用抗原、抗體的特異性結合反應以及特殊的抗體標記技術，進而對目的蛋白進行定性、相對定量檢測的技術。常見問題Q蛋白提取后可以存放多久？A：蛋白提取后-80℃可保存一年。建議分裝保存，避免反復凍融。Q蛋白提取時用進行超聲破碎嗎？A：一般
2021
02-04

您了解醋酸辛酯嗎？
醋酸辛酯為無色透明液體，熔點-38.5℃，沸點210℃，相對密度0.8705（20/4℃），折光率1.4190，閃點86℃。溶于醇、醚，微溶于水。別名是：乙酸辛基酯;乙酸正辛酯;醋酸-2-乙基己酯;乙酸辛酯。醋酸辛酯的生產方法:工業上，由辛醇與乙酸酯化而得。將32.5kg辛醇、16kg乙酸、19kg苯和250g硫酸攪拌均勻。加熱進行酯化。回收苯約13kg后，冷至30℃以下，用5%的碳酸鈉溶液洗去酸性，再用水洗。用無水碳酸鈉干燥24h以上，然后進行分餾，收集210-215℃餾分即為乙酸正辛酯。醋酸
2021
01-29

一種增強單細胞免疫印跡檢測的光敏水凝膠
單細胞蛋白分析是一條可以更深入的了解免疫應答、信號傳導、靶向治療的途徑。微流控芯片和免疫分析的出現為單細胞蛋白質組學的研究提供了新平臺。單細胞免疫印跡法（scWB）是一種可對單細胞表面、胞內和核內蛋白質進行多重檢測的方法。它結合了基于微芯片的十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳方法（SDS-PAGE）和凝膠內蛋白質光捕獲及免疫探針方法。然而，由于原位免疫印跡的特殊性，scWB常常無法檢測低豐度的蛋白質。凝膠內免疫探測的成功在很大程度上取決于蛋白質的固定化效率。目前，一種典型的光親和標記二苯甲酮（B
2021
01-29

教你成為平淡無奇的WB實驗小能手—樣本制備篇
WB實驗流程樣本制備的步驟關于樣本采集和保存，蛋白提取的相關知識和技巧請查看：接下來，讓小編帶您總結關于蛋白定量和蛋白變性相關的知識點：一蛋白定量測定蛋白常用的方法有Bicinchoninicacid(BCA)法、Lowry法和Bradford法（考染法）1.BCA法的測定原理是蛋白質將銅離子還原成亞銅離子，后者在堿性溶液中與BCA結合生成紫紅色結合物，該復合物在562nm處有吸光值且與蛋白質濃度成正相關性，據此可測定蛋白質濃度。考馬斯亮藍在游離狀態下呈紅色，大光吸收在488nm；當它與蛋白質結
2021
01-29

定位重塑型納米凝膠介導共遞送抗血管藥物和自噬抑制劑實現對腫瘤的協同治療
腫瘤是一種復雜難治的疾病，對人類健康存在重大威脅。當腫瘤體積超過2-3mm3時，腫瘤的增殖、轉移與擴散主要依靠自身的血管系統來提供必要的氧氣和營養物質。而在缺乏血管的情況下，腫瘤具有自限性生長的特點。因此，將腫瘤血管作為靶點，抑制它的形成或破壞其存在，直接切斷腫瘤增殖與轉移的營養通道，是一個有吸引力的治療策略。目前，根據作用機制的不同，血管靶向藥物（VTAs）主要包括兩大類：血管生成抑制劑（AIs）和血管阻斷劑（VDAs）。在VDAs中，康普瑞汀（CA4）作為常用的小分子血管阻斷劑，具有良好的抗
2021
01-26

磁珠核酸提取試劑的工作原理及提取優勢分析
核酸提取試劑適用于從樣本中提取細菌、病毒、寄生蟲的基因組核酸DNA和RNA。專為96孔板自動化平臺而設計，可幫助實驗者顯著提升樣本提取的通量。工作原理：該試劑采用*磁珠和緩沖液系統，磁珠表面修飾有特殊化學基團，在一定條件下對DNA/RNA具有很強的富集能力，當條件改變時有可以可逆的釋放DNA/RNA，從而達到快速分離純化DNA/RNA的目的，并可去除蛋白質等雜質。提取所得的高質量核酸可用于PCR、RT-PCR、基因測序等系列實驗。磁珠法核酸提取試劑的優勢：磁珠法DNA提取是納米科技與生物技術的結

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