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2014
12-04

免疫球蛋白的分類及使用
免疫球蛋白(immunoglobulin，ig)是一組具有抗體活性的蛋白質(zhì)，ig由漿細(xì)胞產(chǎn)生，主要存在于生物體血液和其他體液（包括組織液和外分泌液）中，約占血漿蛋白總量的20％；還可分布在b細(xì)胞表面。人血漿內(nèi)的免疫球蛋白大多數(shù)存在于丙種球蛋白（γ-球蛋白）中。免疫球蛋白可分為五類，即免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白D（IgD）和免疫球蛋白E（IgE），IgG，IgA和IgM還有亞類。IgG，IgD，IgE均為單體，分泌液中IgA（SIgA）是雙體
2014
11-27

elisa試劑盒檢測(cè)原理及主要影響
ELISA檢測(cè)試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測(cè)技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在HEVIgM抗體，這些抗體就會(huì)與HEV的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會(huì)與*次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，加入
2014
11-24

乙酸酐的作用與用途
乙酸酐即無色透明液體。有強(qiáng)烈的乙酸氣味。味酸。有吸濕性。折光率。溶于氯仿和乙*緩慢地溶于水形成乙酸。與乙醇作用形成乙酸乙酯。易燃，其蒸氣與空氣可形成爆炸性混合物，遇明火、高熱能引起燃燒爆炸。與強(qiáng)氧化劑接觸可發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。[1]能使醇、酚、氨和胺等分別形成乙酸酯和乙酰胺類化合物。在路易斯酸存在下，乙酐還可使芳烴或烯徑發(fā)生乙酰化反應(yīng)。在乙酸鈉存在下，乙酐與苯甲醛發(fā)生縮合反應(yīng)，生成肉桂酸。緩慢溶于水變成乙酸。與醇作用生成乙酸乙酯。乙酐是重要的乙酰化試劑，乙酐用于制造纖維素乙酸酯；乙酸塑料；不燃性電影膠
2014
11-24

酶標(biāo)儀操作事項(xiàng)
酶標(biāo)儀操作事項(xiàng)酶標(biāo)儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應(yīng)結(jié)果，因此要得到準(zhǔn)確結(jié)果，試劑盒的使用必須規(guī)范。許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀之前是通過目測(cè)判斷結(jié)果，操作過程隨意性較大，在使用酶標(biāo)儀后如果不能及時(shí)糾正操作習(xí)慣，會(huì)造成較大誤差。在此上海科興商貿(mào)有限公司給大家介紹一下在酶標(biāo)儀的操作中應(yīng)注意以下事項(xiàng)：使用加液器加液，加液頭不能混用。洗板要洗干凈。如果條件允許，使用洗板機(jī)洗板，避免交叉污染。嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作，反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確。在測(cè)量過程中，請(qǐng)勿碰酶標(biāo)板，以防酶標(biāo)板傳送時(shí)擠傷操作人員的手。請(qǐng)勿將樣品或
2014
11-17

細(xì)胞凍存液的配置以及凍存步驟
凍存液先關(guān)鍵在于冷凍保護(hù)劑，一般常用DMSO此類滲透性保護(hù)劑，一般是以9份小牛血清或細(xì)胞培養(yǎng)液與1份的DMSO混合而成，現(xiàn)配現(xiàn)用或配置后放入普通冰箱冰盒內(nèi)冷凍保存，使用前于室溫水浴融化。關(guān)鍵在于DMSO的終濃度為10％，對(duì)于普通細(xì)胞來說，小牛血清濃度似乎高點(diǎn)越好，但沒有這個(gè)必要，用細(xì)胞培養(yǎng)液即可。細(xì)胞凍存1.預(yù)先配制凍存液：10%DMSO+90%胎牛血清，4℃冰箱保存預(yù)冷；2.用胰酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化：倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基，PBS沖洗兩次，用胰酶消化細(xì)胞（盡可能溫和）；
2014
11-13

小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子1ELISA試劑盒樣本處理及要求
小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子1ELISA試劑盒樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸
2014
11-10

細(xì)胞的生物電現(xiàn)象
（1）靜息電位及其產(chǎn)生機(jī)制：靜息電位是指細(xì)胞膜處于安靜狀態(tài)下存在于膜內(nèi)外兩側(cè)的電位差。采用細(xì)胞內(nèi)電位記錄地方法所記錄到的電位是以細(xì)胞外為零電位的膜內(nèi)電位，絕大多數(shù)細(xì)胞的靜息電位是穩(wěn)定的負(fù)電位。靜息電位產(chǎn)生的機(jī)制：安靜時(shí)細(xì)胞這種數(shù)值比較穩(wěn)定的內(nèi)負(fù)外正的狀態(tài)稱為極化;（是靜息狀態(tài)的標(biāo)志）以靜息電位為準(zhǔn)若膜內(nèi)電位向負(fù)值增大的方向變化稱為超極化；若膜內(nèi)電位向負(fù)值減少的方向變化稱為去極化；細(xì)胞發(fā)生去極化后向原先的極化方向恢復(fù)稱為復(fù)極化。機(jī)制：①鈉泵主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)造成的細(xì)胞膜內(nèi)、外Na+和K+的不均勻分布是形成生
2014
11-06

抗原和抗體濃度
對(duì)于一個(gè)給定的抗原，佳的抗體濃度依賴的抗原和抗體本身。抗原和抗體的親和力，以及一抗與二抗的特異反應(yīng)都是不同的。優(yōu)抗原和抗體濃度可通過免疫印跡實(shí)驗(yàn)中使用不同濃度的抗原和抗體作用確定。另外，更快和更簡單的方法是進(jìn)行斑點(diǎn)印跡實(shí)驗(yàn)。以下是使用超敏感信號(hào)底物進(jìn)行的斑點(diǎn)印跡的操作方法。1.用TBS和PBS稀釋的蛋白樣品，好的稀釋方法是由樣品中的抗原稀釋濃度決定的，但是由于抗原的濃度是未知的，所以有必要進(jìn)行寬范圍的稀釋度的檢測(cè)。SuperSignalWestPic化學(xué)發(fā)光底物的檢測(cè)靈敏度可達(dá)皮g水平，所以樣品
2014
11-03

標(biāo)本外源因素對(duì)elisa試劑盒檢測(cè)結(jié)果的影響
①標(biāo)本溶m：由于各種原因引起的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放m大量具有過氧化物酶活性的m紅蛋向，在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色，干擾測(cè)定結(jié)果J。所以標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶m。②標(biāo)本受細(xì)菌污染：因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶標(biāo)本一樣，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。③標(biāo)本保存不當(dāng)：在冰箱中保存過久的標(biāo)本，10}清中IgG可聚合成多聚體、AFP形成二聚體，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過深，甚造成假陽性。ELISA測(cè)定
2014
10-30

乳腺中發(fā)現(xiàn)多能干細(xì)胞
發(fā)現(xiàn)了乳腺中的多能干細(xì)胞，“刷新”了由國外科學(xué)家的乳腺干細(xì)胞只存在單潛能性的理論。該研究成果以干細(xì)胞為切入點(diǎn)，為靶向治療乳腺癌提供新思路、奠定了應(yīng)用的基礎(chǔ)。成年人的許多器官中存在著干細(xì)胞，也稱組織干細(xì)胞。干細(xì)胞因?yàn)樯形捶只⒕哂性偕鷿撃芏挥鳛椤叭f用細(xì)胞”。根據(jù)發(fā)育潛能又分為三類：干細(xì)胞、多能干細(xì)胞和單能干細(xì)胞。乳腺癌有多種分型。目前，臨床上有20%左右的乳腺癌（三陰性乳腺癌）病人無藥可醫(yī)，原因是其腫瘤處于低分化的“漠然”狀態(tài)，現(xiàn)有的藥物和療法皆無法令其應(yīng)答。而這部分患者又恰恰是乳腺癌中轉(zhuǎn)移率高
2014
10-27

內(nèi)源性干細(xì)胞激活能治ED嗎？
目前，ED常用的治療方式為口服磷酸二酯酶抑制劑和陰莖海綿體藥物注射療法，但需性生活前一次性使用，“治標(biāo)不治本”且臨床效果有限。上述治療無效的患者，需陰莖起搏器植入手術(shù)，但價(jià)格昂貴，大多數(shù)患者難以接受。發(fā)現(xiàn)其改善勃起功能障礙呈劑量依賴性，且能有效改善ED動(dòng)物模型的病理變化。進(jìn)一步對(duì)其機(jī)制深入研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿次苷具有促使標(biāo)簽滯留細(xì)胞向平滑肌細(xì)胞和雪旺細(xì)胞分化的能力。其機(jī)制可能與活性增高的P38MAPK細(xì)胞通路有關(guān)。與此同時(shí)，我們?cè)谘芯康湍芰繘_擊波治療糖尿病ED的過程中，發(fā)現(xiàn)低能量沖擊波能顯著改善病理
2014
10-20

夜間癌細(xì)胞擴(kuò)散的更快？
研究人員發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞在夜間擴(kuò)散得比白天快，其原因就在于一種激素：糖皮質(zhì)激素(Glucocorticoids，縮寫為GC)抑制了有助轉(zhuǎn)移的表皮生長因子受體(Epidermalgrowthfactorreceptor，縮寫為EGFR)，由于夜晚糖皮質(zhì)激素分泌下降，EGFR高度活躍，因此這些癌細(xì)胞在夜晚要擴(kuò)散的更快。研究人員表示這提示我們，夜間治療腫瘤效果要比白天好，也許醫(yī)院和腫瘤診所可以考慮改變化療的時(shí)間了。這一發(fā)現(xiàn)也指出了解析細(xì)胞不同受體之間的相互作用的必要性，而后者正是我們還并不*了解的一個(gè)復(fù)雜網(wǎng)
2014
10-16

解析重要的代謝通路
細(xì)胞需要根據(jù)當(dāng)前的環(huán)境信號(hào)調(diào)整自己的大小和生長速度。人們發(fā)現(xiàn)，mTORC1通路可以感知細(xì)胞應(yīng)激、生長因子、以及營養(yǎng)物質(zhì)的可用性（比如氨基酸和葡萄糖），并在此基礎(chǔ)上控制細(xì)胞生長和機(jī)體的內(nèi)部平衡。這一通路一直是科學(xué)家們關(guān)注的熱點(diǎn)。在營養(yǎng)物質(zhì)（氨基酸）存在的情況下，RagGTPase會(huì)將mTORC1招募到溶酶體使其激活，但此前人們并不清楚Rag的具體調(diào)控機(jī)制。Rag蛋白家族是類似Ras的小GTPase。研究人員發(fā)現(xiàn)，Sestrin能與異源二聚體RagA/B-RagC/DGTPase結(jié)合，是RagA和R
2014
10-13

繪制新蛋白質(zhì)組圖譜
由N-肉豆蔻酰基轉(zhuǎn)移酶（NMT）介導(dǎo)的N-豆蔻酰化，是一種非常普遍的蛋白修飾，與許多人類疾病的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。獲得了N-豆蔻酰化蛋白質(zhì)組的全景圖。他們?cè)诖嘶A(chǔ)上鑒定了一百多個(gè)NMT的新蛋白底物，還找到了一個(gè)能夠阻斷NMT活性的小分子。NMT能對(duì)蛋白進(jìn)行不可逆的修飾，它的這種功能與癌癥、癲癇、阿爾茨海默癥等疾病有關(guān)。研究人員在人類癌癥細(xì)胞中，鑒定了一百多個(gè)NMT修飾的N-豆蔻酰化蛋白，其中超過95%是在天然環(huán)境中檢測(cè)到。這項(xiàng)研究中的NMT抑制劑，將有望成為治療癌癥的新途徑。“這項(xiàng)研究為人們?nèi)嬲故?
2014
10-09

制備ALS/dementia小鼠模型
隨著今年夏天風(fēng)靡一時(shí)的冰桶挑戰(zhàn)賽，漸凍人癥（ALS，肌萎縮側(cè)索硬化癥）引起了公眾的廣泛關(guān)注。“漸凍人癥”是世界衛(wèi)生組織開列的五大絕癥之一，醫(yī)學(xué)名為(AmyotrophicLateralSclerosis,簡稱“ALS”)，是運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元病（MotorNeuronDisease，簡稱M.N.D）的一種，因?yàn)榛颊叽竽X、腦干和脊髓中運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞受到侵襲，患者肌肉逐漸萎縮和無力，以癱瘓，身體如同被逐漸凍住一樣，故俗稱“漸凍人”。由于感覺神經(jīng)并未受到侵犯，因此這種病并不影響患者的智力、記憶及感覺。泛醌蛋白2
2014
09-29

DNA測(cè)序技術(shù)揭示蝴蝶進(jìn)化史
科學(xué)家對(duì)一些常見蝴蝶和飛蛾的將近3000個(gè)基因進(jìn)行跟蹤研究，一直追溯到它們古老的祖先，并制作出一份涵蓋廣泛的“鱗翅目樹”——這也是利用大范圍下一代DNA測(cè)序技術(shù)進(jìn)行的研究。研究揭示出許多令人吃驚的發(fā)現(xiàn)，其中一項(xiàng)就是在親緣關(guān)系上，蝴蝶與小飛蛾的關(guān)系比與大飛蛾間更加密切。這*改變了科學(xué)家對(duì)蝴蝶進(jìn)化的理解。研究還發(fā)現(xiàn)，曾被劃歸為飛蛾類的一些昆蟲實(shí)際上是蝴蝶，蝴蝶的品種數(shù)量越來越多，超過人們以前所想象的。“這一項(xiàng)目促進(jìn)了生物多樣性研究，為各種各樣的昆蟲提供了一個(gè)進(jìn)化的基礎(chǔ)，地球上已知的昆蟲有近16萬種。
2014
09-28

表觀遺傳學(xué)調(diào)控
胚胎干細(xì)胞具有分化成為各種成熟體細(xì)胞的能力，這種特性使胚胎干細(xì)胞無論在基礎(chǔ)研究還是在臨床應(yīng)用上，都具有非常重要的價(jià)值。深入解析胚胎干細(xì)胞的自我更新和分化機(jī)制，一直是科學(xué)家們關(guān)注的焦點(diǎn)之一。包括組蛋白修飾在內(nèi)的表觀遺傳學(xué)修飾，能在不改變DNA序列的情況下影響基因的表達(dá)。根據(jù)修飾位點(diǎn)以及修飾狀態(tài)的不同，組蛋白甲基化能夠激活或抑制基因轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而調(diào)控胚胎干細(xì)胞定向分化等正常生理過程。研究人員發(fā)現(xiàn)，Setd2主要調(diào)控鼠類胚胎干細(xì)胞（mESC）向原始內(nèi)胚層分化。進(jìn)一步研究顯示，在Setd2?/?mESC中下
2014
09-25

細(xì)菌轉(zhuǎn)錄爆發(fā)現(xiàn)象的分子機(jī)制被揭示
揭示了細(xì)菌內(nèi)轉(zhuǎn)錄隨機(jī)爆發(fā)現(xiàn)象(Transcriptionalbursting)的分子機(jī)制，這種隨機(jī)性是很多細(xì)胞和組織中細(xì)胞與細(xì)胞間基因表達(dá)量不同的主要根源之一。從大概十年前開始，研究人員在不同的細(xì)胞中都發(fā)現(xiàn)了一個(gè)普遍的現(xiàn)象，即很多基因的轉(zhuǎn)錄都是以隨機(jī)爆發(fā)的形式進(jìn)行著的，轉(zhuǎn)錄的活躍程度會(huì)在十分活躍和很不活躍之間來回的跳躍。更令人感到困惑的是，即使是在充分去除了轉(zhuǎn)錄抑制蛋白以及其它各種之前已知的可能會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄抑制的機(jī)制之后，所觀察到的基因轉(zhuǎn)錄依然是隨機(jī)爆發(fā)形式的，而其機(jī)制并未得到很好的解釋。利用超高
2014
09-22

應(yīng)該如何復(fù)蘇干細(xì)胞？
在理論上，細(xì)胞在–196°C的液氮中可以穩(wěn)定存在很多年。激活細(xì)胞死亡和分化通路的是冷凍和復(fù)蘇過程。因此，復(fù)蘇干細(xì)胞的時(shí)機(jī)*取決于你自身的需要。冷凍過程需要慢而穩(wěn)，而細(xì)胞復(fù)蘇要很快。對(duì)于細(xì)胞復(fù)蘇而言，速度是很有必要的，現(xiàn)在大家都在追求快速復(fù)蘇。干細(xì)胞的試管可以放在37°C水浴中解凍，然后用生長培養(yǎng)基重懸。如果想除去DMSO，還可以洗幾個(gè)循環(huán)。細(xì)胞復(fù)蘇之后，好用幾天時(shí)間來培養(yǎng)，篩查它們的功能是否正常。
2014
09-18

*人工細(xì)胞有望產(chǎn)生
目前他在開展生命起源和細(xì)胞合成方面的研究，包括原始細(xì)胞是怎樣形成的、細(xì)胞膜的功能和形成以及RNA的復(fù)制，把所有這些東西都放在一起的話有望產(chǎn)生*個(gè)人工細(xì)胞，也就意味著人類可以在實(shí)驗(yàn)室條件下重現(xiàn)生命的起源，他認(rèn)為這項(xiàng)研究終會(huì)取得成功，一旦人類了解了地球的原始生命形成時(shí)所具備的各種條件，那么人類對(duì)生命是怎么產(chǎn)生的就會(huì)有非常深入的了解。這就是大健康的機(jī)遇和挑戰(zhàn)。一直致力于研究端粒和癌癥之間的關(guān)系，影響衰老的主要原因，端粒位于人類染色體的末端，每復(fù)制一次端粒就縮短一點(diǎn)，這就是生命有限的原因，但是對(duì)于癌細(xì)胞

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