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上海申知心生物科技有限公司
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建立胃癌動物模型2017/08/31
1.甲基膽蒽誘發小鼠胃癌動物模型(1)取20g左右的小鼠,無菌手術下,在腺胃粘膜面穿掛含甲基膽蒽(MC)線結。(2)含MC的線結是用普通細線,在一端打結后,將線結置于盛有MC小玻璃試管內,在酒精燈上微微加溫,使MC液化滲入線結。MC濃度為0.05~0.1g20-甲基膽蒽內浸入10~20根線。(3)手術埋線后4~8個月可誘發成功胃癌。2.不對稱亞硝胺誘發小鼠胃癌動物模型劑量為0.25ml/kg體重,3個月后全部動物發生前胃乳頭狀癌,7~8個月后有85~發生前胃癌。昆明種敏感。A系次之,615系小鼠
建立食管癌動物模型2017/08/30
1.(CH3)2NNO(MBNA)誘發大鼠食管癌動物模型(1)取體重100g以上的Wistar大鼠;(2)任其食用含(CH3)2NNO的飲水,并將MBNA摻入飼料中使每日攝入量達0.75~1.5mg/kg體重;(3)80~100天可誘發成食管癌。2.二烴黃樟素(Dihydrosafrole)誘發大鼠食管癌動物模型(1)二烴黃樟素是一種制備啤酒的調味品,在大鼠飼料中加入百萬分之二千五百至一萬(2500~10000ppm)黃樟素,就能引起20~75%的食管癌。3.(CH3)2NNO誘發大鼠食管癌動物
幾種核酸提取方法2017/08/24
(1)濃鹽法利用RNP和DNP在電解溶液中溶解度不同,將二者分離,常用的方法是用1MNacl抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的CCL3一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質,此時蛋白質凝膠停留在水相及CCL3相中間,而DNA位于上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA鈉鹽沉淀出來.也可用0.15MNaCL液反復洗滌細胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白,再按CCL3---異醇法除去蛋白.兩種方法比較,后種方法使核酸降解可能少一些.以稀鹽酸溶液提取DNA時,加入適量去污劑,如SD
2017年度國自然基金結果公布了!2017/08/23
?2017年3月1日至3月20日項目申請集中接收期間,自然科學基金委員會(以下簡稱自然科學基金委)共接收項目申請190840項,經初步審查和復審后共受理187135項。依據《自然科學基金條例》和自然科學基金相關管理辦法,經專家評審和委務會議審批,決定資助面上項目18136項、重點項目667項、重大項目2項、重點(地區)合作研究項目107項、青年科學基金項目17523項、青年科學基金項目399項、創新研究群體項目38項、海外及港澳學者合作研究基金項目142項、地區科學基金項目3017項、部分聯合基
免疫沉淀實驗2017/08/17
一、服務介紹免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是指利用抗體與抗原間的特異性結合特性,將抗原(我們感興趣的靶蛋白)-抗體復合物從樣品中分離出來,達到初步分離純化靶蛋白的目的。之后,樣品可以再進行Westernblot分析。二、實驗原理免疫沉淀是利用抗原與抗體免疫反應達到純化,定性檢測蛋白的目的,即在蛋白質提取液中加入與抗原(靶蛋白質)特異性結合的抗體,抗體與抗原結合后形成免疫復合物,再與蛋ProteinA/G或二抗偶聯的瓊脂糖珠子孵育,通過離心得到免疫復合物再經過純化,洗脫后
PAS染色法實驗2017/08/16
一、服務介紹PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應使呈現紫紅色。隨著醫學實驗技術的發展,糖原染色應用的范圍更加廣泛,如用以證明與鑒別細胞內空泡狀的性質,心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些腫瘤的診斷等。二、實驗原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。PAS染色一般用來顯示糖元和其它多糖物質。過碘酸能使細胞內的多糖
高質量RNA提取條件之一2017/08/09
1.迅速滅活內源的RNA酶,以防止RNA降解。以下3個方法均可有效使內源RNA酶失活:1)用含離液(如胍鹽)的細胞裂解液收獲樣品,并立即勻漿。2)用液氮瞬間凍結樣品。值得特別注意的是:組織塊足夠小,在浸入液氮的瞬間就能凍結,以瞬間令RNA酶失活。3)立即將樣品置于RNAfixer無液氮RNA樣品儲存液中。它是一種水相、無毒的收集試劑,能立即穩定并保護完整、未凍結的組織和細胞樣品中的RNA。關鍵要點是組織樣品切片要夠薄(),這樣RNAfixer才能在RNase破壞RNA之前迅速滲入組織塊中。2.低
血清的保存方式2017/08/07
血清的保存應該注意以下幾點:(1)生物學實驗中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,預留體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已解凍的血清。生物學實驗中加熱過程中須規則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量。補體參與反應有:細胞毒作
結締組織類細胞培養2017/07/31
一、成纖維細胞培養用人或動物胚體為好;動物可用小鼠或雞胚,去頭和內臟,剪成小碎塊后,用胰蛋白酶消化法培養;如為人胚,可取皮膚培養。幼兒包皮是培養成纖維細胞的很好對象。二、巨噬細胞培養1.實驗前三天,向每只小鼠腹腔內注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml(勿注入腸內)。2.引頸殺死動物,手提鼠尾將全鼠浸入70%酒精中3~5秒。3.置動物于解剖臺上,用針頭固定四肢,雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側,暴露出腹膜,但勿傷及腹膜壁。4.再用70%酒精擦洗腹膜壁后,用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中,同時從兩側用手指揉壓
動物交際實驗2017/07/26
一、動物交際實驗原理:動物交際實驗利用小鼠熟悉了環境后,檢測小鼠靠近位于實驗箱中裝有另一只陌生小鼠的金屬籠的時間,來判斷小鼠的社交能力。二、動物交際實驗參數指標:活動距離、運動速度、測試時間區域指標各區域運動路程、逗留時間、靜止時間各區域(左區域、右邊區域、中央區域)次進入時間、進入次數長訪問時間、短訪問時間、進入前總路程、次離開時間特色指標束縛鼠間的接觸次數、接觸持續時間、次接觸時間、接近時間與束縛鼠間距離、與束縛鼠間小距離。
動物交際實驗2017/07/20
一、動物交際實驗用途用于檢測動物的自閉行為二、動物交際實驗原理:利用小鼠熟悉了環境后,檢測小鼠靠近位于實驗箱中裝有另一只陌生小鼠的金屬籠的時間,來判斷小鼠的社交能力。三、動物交際實驗參數指標:活動距離、運動速度、測試時間區域指標各區域運動路程、逗留時間、靜止時間各區域(左區域、右邊區域、中央區域)次進入時間、進入次數長訪問時間、短訪問時間、進入前總路程、次離開時間特色指標束縛鼠間的接觸次數、接觸持續時間、次接觸時間、接近時間與束縛鼠間距離、與束縛鼠間小距離。
教你選擇和使用細胞培養板2017/07/20
細胞培養板作為培養細胞的一種常用和重要的工具,形狀、規格、用途多樣,你是否也為如何選擇適合的培養板而迷茫?你是否正為如何方便、正確的使用培養板而苦惱?你對如何處理培養板是否也有困惑?對不同的培養板各有什么妙用你又有何體會?1)細胞培養板的選擇:細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536孔等;根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。平底和圓底(U型和
T迷宮實驗2017/07/10
(1)近半個世紀前,Kivy和Dember等人證明大鼠能辨別T-形迷宮(T-maze)兩臂顏色的變化。他們發現,將雄性大鼠置于T-形迷宮的主干臂15-30min,讓其能看見、但不能進入黑白兩臂。然后,改變其中一個臂的顏色,使兩臂同為黑色或白色。讓大鼠自由選擇T-形臂。結果顯示,大鼠總是選擇改變了顏色的那個臂(新異臂)。這一過程要依靠動物的記憶來完成。由此發展而成的T-形迷宮實驗成為目前用于評價空間記憶的常用的動物模型之一。當然,現在的T-形迷宮使用的是食物而不是臂的顏色作為動物探究的動力。通常用
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