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免疫組化分析簡(jiǎn)單介紹2017/12/07: 你想要免疫組化的片子能更快更準(zhǔn)確地識(shí)別么？你想要瞬間就把組畫(huà)里的陽(yáng)性評(píng)級(jí)都算好么？下面簡(jiǎn)單介紹下免疫組化簡(jiǎn)單分析。是有這么個(gè)小插件能用一下的，這個(gè)插件是在ImageJ里的一個(gè)小插件。這個(gè)插件叫IHCProfiler，下載完有這么倆文件，全部復(fù)制粘貼到ImageJ的Plugin文件夾里:先通過(guò)ImageJ打開(kāi)免疫組化的圖片：然后，從上面的Plugins的菜單里找到IHCProfiler：接著選擇細(xì)胞質(zhì)中的表達(dá)：然后選擇DAB染色：于是，顏色就直接分開(kāi)了：當(dāng)然，這不能做為直接的評(píng)分，接著就要用IHC

細(xì)胞增殖到底用MTT還是CCK8呢？2017/11/30: MTT增殖曲線，基本上就是基礎(chǔ)的功能實(shí)驗(yàn)了，養(yǎng)過(guò)細(xì)胞的你應(yīng)該都會(huì)做。但是，要怎么樣才能省時(shí)省力呢？你也知道，如果用MTT的話，加入10ul的MTT后要等四個(gè)小時(shí)，在活細(xì)胞的線粒體中形成甲囋，然后在把培養(yǎng)基吸掉，再加上DMSO溶解，進(jìn)行檢測(cè)。這個(gè)方法是常用的MTT方法，但是會(huì)有三個(gè)問(wèn)題，*個(gè)是有的甲囋不容易溶解。還有一個(gè)問(wèn)題就是，由于要讓DMSO充分溶解甲囋，所以會(huì)要混勻，就會(huì)產(chǎn)生泡沫，影響酶標(biāo)儀讀值：第三個(gè)問(wèn)題，就是在吸去培養(yǎng)基的時(shí)候，容易把甲囋也吸走，導(dǎo)致終讀值不準(zhǔn)。當(dāng)然也不是沒(méi)有辦法的，這篇

你真以為做ceRNA就這么簡(jiǎn)單么？2017/11/23: 大家一直都覺(jué)得ceRNA的研究，就是研究LncRNA的簡(jiǎn)便機(jī)制了是吧。因?yàn)槎疾挥脕?lái)論證啥，就直接證明LncRNA和對(duì)應(yīng)的mRNA能同時(shí)結(jié)合miRNA就行了，不是么？其實(shí)，也不全是，當(dāng)然，要是把ceRNA作為低分的LncRNA研究機(jī)制的話，那簡(jiǎn)單的就是做一個(gè)Luciferase實(shí)驗(yàn)：也就是利用Luciferase的3'UTR結(jié)合miRNA，來(lái)驗(yàn)證一下lncRNA和mRNA是不是分別能和miRNA結(jié)合。這個(gè)都是研究miRNA的基本套路。但LncRNA并不會(huì)表達(dá)蛋白，所以用Luciferase的方法，

發(fā)CNS文章，都用了哪些試劑盒？2017/11/23: 你要知道哪個(gè)抗體好用么？哪個(gè)qPCR試劑盒用了以后發(fā)了高分蚊帳？我是不知道，但我知道要怎么樣才能知道。是不是很拗口？挖掘文獻(xiàn)，除了挖數(shù)據(jù)還能挖出點(diǎn)啥？能挖出試劑盒和試劑好不好用，嗯，沒(méi)錯(cuò)，有很多文獻(xiàn)的MaterialsａndMethods里面會(huì)標(biāo)明試劑盒的生產(chǎn)供應(yīng)商。就是有這么一個(gè)文獻(xiàn)挖掘工具，可以幫你挖出文獻(xiàn)中的試劑盒：我們隨便輸入一個(gè)GFP的抗體查查看哈，就出現(xiàn)了這樣的結(jié)果：當(dāng)然這樣的結(jié)果，你并不會(huì)看得很懂。我們拆解一下哈,左側(cè)那一欄，是挖掘出來(lái)的，與這個(gè)抗體相關(guān)的供應(yīng)商以及相關(guān)實(shí)驗(yàn)：接著，

如何快速找出miRNA相關(guān)的信號(hào)通路？2017/11/16: 那天突然有人問(wèn)我，miRNA是不是能做出那種network的網(wǎng)絡(luò)圖，就跟那種文章里一樣？其實(shí)我自己也忘了到底應(yīng)該怎么整了，簡(jiǎn)單點(diǎn)的話，就自己去搜搜看miRNA怎么樣對(duì)應(yīng)基因做成列表就行了吧。但是負(fù)責(zé)任的我，還是搜到了一些miRNA分析的工具。對(duì)，就是上面這個(gè)工具，可以分析單個(gè)基因或者多個(gè)基因?qū)蝹€(gè)miRNA和多個(gè)miRNA，實(shí)際上跟形成network圖沒(méi)什么關(guān)系。只是覺(jué)得這個(gè)做出來(lái)的東西，還蠻有意思的。我們可以搜多個(gè)miRNA與多個(gè)基因間的關(guān)系：然后，它就會(huì)生成這么一個(gè)特別草率的二型網(wǎng)絡(luò)圖……點(diǎn)

突破！科學(xué)家有望利用干細(xì)胞來(lái)開(kāi)發(fā)出*糖尿病的新型療法2017/11/16: 日前，一項(xiàng)在雜志NatureCellBiology上的研究報(bào)告中，來(lái)自哥本哈根大學(xué)的研究人員通過(guò)進(jìn)行一項(xiàng)新型的干細(xì)胞研究，闡明了如何有效增加糖尿病患者機(jī)體中胰島素的產(chǎn)生，這項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)或能幫助研究者更加有效地以低成本通過(guò)人類干細(xì)胞來(lái)制造產(chǎn)生胰島素的β細(xì)胞，同時(shí)也能開(kāi)發(fā)出治療糖尿病的有效療法，對(duì)于開(kāi)發(fā)治療其它疾病的新型療法也具有重要的意義。目前有4.15億糖尿病患者，而且這一數(shù)字仍在繼續(xù)上升中，糖尿病患者的共同點(diǎn)就是機(jī)體中缺乏制造足夠胰島素的能力，進(jìn)而誘發(fā)患者出現(xiàn)一系列并發(fā)癥和致死性疾病等；胰島素能

肥胖癥疾病研究中動(dòng)物模型2017/11/10: 肥胖癥是一組常見(jiàn)的代謝癥群。當(dāng)人體進(jìn)食熱量多于消耗熱量時(shí)，多余熱量以脂肪形式儲(chǔ)存于體內(nèi)，其量超過(guò)正常生理需要量，且達(dá)值時(shí)遂演變?yōu)榉逝职Y。正常男性成人脂肪組織重量占體重的15%～18%，女性占20%～25%。隨年齡增長(zhǎng)，體脂所占比例相應(yīng)增加。關(guān)于肥胖的評(píng)估方法，包括人體測(cè)量學(xué)、雙能X線吸收法、超聲、CT、紅外線感應(yīng)法等多種。如無(wú)明顯病因者稱單純性肥胖癥，有明確病因者稱為繼發(fā)性肥胖癥。外因以飲食過(guò)多而活動(dòng)過(guò)少為主。熱量攝入多于熱量消耗，使脂肪合成增加是肥胖的物質(zhì)基礎(chǔ)。內(nèi)因?yàn)橹敬x紊亂而致肥胖。1.

低血糖疾病動(dòng)物模型2017/11/10: 低血糖是指成年人空腹血糖濃度低于2.8mmol/L。糖尿病患者血糖值≤3.9mmol/L即可診斷低血糖。低血糖癥是一組多種病因引起的以靜脈血漿葡萄糖（簡(jiǎn)稱血糖）濃度過(guò)低，臨床上以交感神經(jīng)興奮和腦細(xì)胞缺氧為主要特點(diǎn)的綜合征。低血糖的癥狀通常表現(xiàn)為出汗、饑餓、心慌、顫抖、面色蒼白等，嚴(yán)重者還可出現(xiàn)精神不集中、躁動(dòng)、易怒甚至昏迷等。臨床上反復(fù)發(fā)生空腹低血糖癥提示有器質(zhì)性疾病；餐后引起的反應(yīng)性低血糖癥，多見(jiàn)于功能性疾病。1.空腹低血糖癥（1）內(nèi)源性胰島素分泌過(guò)多：常見(jiàn)的有胰島素瘤、自身免疫性低血糖等。（

SCTM：發(fā)現(xiàn)一種新的干細(xì)胞來(lái)源---骨膜組織2017/11/03: 在一項(xiàng)新的研究中，研究人員發(fā)現(xiàn)在常規(guī)的髖關(guān)節(jié)置換術(shù)(hipreplacementsurgery)期間通常丟棄的骨膜組織富含成體干細(xì)胞，有望提供一種用于再生醫(yī)學(xué)的干細(xì)胞新來(lái)源。相關(guān)研究結(jié)果近期在StemCellsTranslationalMedicine期刊上，標(biāo)題為“Arthriticperiostealtissuefromjointreplacementsurgery:anovel,autologoussourceofstemcells”。鑒于每年有上萬(wàn)人接受髖關(guān)節(jié)置換術(shù)治療，這種組織可能在臨

小鼠干細(xì)胞的新突破2017/10/25: 英國(guó)研究團(tuán)隊(duì)在近日《自然》雜志上撰文指出，他們借助一種全新方法，利用小鼠發(fā)育初期的4—8個(gè)細(xì)胞胚胎，培育出了一種干細(xì)胞系——擴(kuò)展?jié)撃芨杉?xì)胞（EPSCs）。新細(xì)胞不僅能發(fā)育成類型的細(xì)胞，且發(fā)育潛力超過(guò)胚胎干細(xì)胞等，對(duì)人類的再生醫(yī)學(xué)意義重大，有望為研究治療流產(chǎn)和發(fā)育紊亂問(wèn)題開(kāi)辟新方向。目前得到的胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞只能發(fā)育成某些特定的細(xì)胞譜系。為了發(fā)現(xiàn)新型干細(xì)胞用于再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域，劍橋大學(xué)韋爾科姆基金會(huì)桑格研究所劉澎濤博士領(lǐng)導(dǎo)的團(tuán)隊(duì)，發(fā)明了一種從發(fā)育初階段開(kāi)始培育干細(xì)胞的新方法。在此階段，受精

高血壓疾病動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究2017/10/20: 高血壓（hypertension）是指以體循環(huán)動(dòng)脈血壓（收縮壓和/或舒張壓）增高為主要特征（收縮壓≥140毫米汞柱，舒張壓≥90毫米汞柱），可伴有心、腦、腎等器官的功能或器質(zhì)性損害的臨床綜合征。高血壓是常見(jiàn)的慢性病，也是心腦血管病主要的危險(xiǎn)因素。正常人的血壓隨內(nèi)外環(huán)境變化在范圍內(nèi)波動(dòng)。在整體人群，血壓水平隨年齡逐漸升高，以收縮壓更為明顯，但50歲后舒張壓呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，脈壓也隨之加大。近年來(lái)，人們對(duì)心血管病多重危險(xiǎn)因素的作用以及心、腦、腎靶器官保護(hù)的認(rèn)識(shí)不斷深入，高血壓的診斷標(biāo)準(zhǔn)也在不斷調(diào)整，目前

動(dòng)脈粥樣硬化研究動(dòng)物實(shí)驗(yàn)2017/10/20: 動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是冠心病、腦梗死、外周血管病的主要原因。脂質(zhì)代謝障礙為動(dòng)脈粥樣硬化的病變基礎(chǔ)，其特點(diǎn)是受累動(dòng)脈病變從內(nèi)膜開(kāi)始，一般先有脂質(zhì)和復(fù)合糖類積聚、出血及血栓形成，進(jìn)而纖維組織增生及鈣質(zhì)沉著，并有動(dòng)脈中層的逐漸蛻變和鈣化，導(dǎo)致動(dòng)脈壁增厚變硬、血管腔狹窄。病變常累及大中肌性動(dòng)脈，一旦發(fā)展到足以阻塞動(dòng)脈腔，則該動(dòng)脈所供應(yīng)的組織或器官將缺血或壞死。由于在動(dòng)脈內(nèi)膜積聚的脂質(zhì)外觀呈黃色粥樣，因此稱為動(dòng)脈粥樣硬化。動(dòng)脈粥樣硬化模型，模型構(gòu)建方式常見(jiàn)有幾種，現(xiàn)在介紹種

RACE技術(shù)的原理和操作2017/10/13: 近年來(lái)隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，出現(xiàn)了許多克隆新基因的方法和手段，如圖譜克隆技術(shù)、轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽技術(shù)、mRNA差異顯示技術(shù)二基因組減法技術(shù)以及cDNA文庫(kù)篩選技術(shù)等。但上述方法人多具有實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)、技術(shù)步驟煩瑣且工作量大等特點(diǎn)。cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)（rapidamplificationofcDNAends，RACE）是一種基于PCR從低豐度的轉(zhuǎn)錄本中快速擴(kuò)增cDNA的5'和3'末端的有效方法，以其簡(jiǎn)單、快速、廉價(jià)等優(yōu)勢(shì)而受到越來(lái)越多的重視.經(jīng)典的RACE技術(shù)是由Frohman等（1988）發(fā)明的一項(xiàng)

實(shí)驗(yàn)助手——質(zhì)粒圖譜如何“瞅”2017/09/28: 每當(dāng)拿到一個(gè)質(zhì)粒圖譜，是不是一下就有點(diǎn)懵了？這些ori、RBS、tet是什么？這些箭頭代表什么，轉(zhuǎn)錄的方向嗎？不要著急，申知心生物把這些告訴你，也許會(huì)解決你的困惑。質(zhì)粒和載體傻傻分不清楚質(zhì)粒(Plasmid)是附加到細(xì)胞中的非細(xì)胞的染色體或核區(qū)DNA原有的能夠自主復(fù)制的較小的DNA分子(即細(xì)胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質(zhì)粒雖然都是環(huán)狀構(gòu)型。載體即要把一個(gè)有用的基因（目的基因——研究或應(yīng)用基因）通過(guò)基因工程手段送到生物細(xì)胞（受體細(xì)胞），需要運(yùn)載工具（交通工具）攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞，這種運(yùn)載

實(shí)驗(yàn)助手—六大要素讓你告別RNA反轉(zhuǎn)錄失敗2017/09/26: RTPrimer的佳選擇通常RTprimer可分為三類：oligodT，隨機(jī)引物以及基因特異性引物。OligodT引物之所以應(yīng)用范圍更加廣泛，是因?yàn)榭捎纱双@得mRNA的全長(zhǎng)拷貝。然而如果mRNA長(zhǎng)度過(guò)長(zhǎng)4kb，或者沒(méi)有polyA尾（原核mRNA或rRNA），就需要考慮使用隨機(jī)引物進(jìn)行RNA的反轉(zhuǎn)錄。隨機(jī)引物雖能長(zhǎng)基因的5’末端的轉(zhuǎn)錄，但并不能獲得整個(gè)基因全長(zhǎng)的cDNAs，且對(duì)RNA樣品質(zhì)量要求比較高，此時(shí)可用6-8個(gè)核酸聚合體來(lái)提高cDNAs的合成量。而對(duì)于真核生物的qPCR，長(zhǎng)隨機(jī)引物和Oli

內(nèi)外科大夫那些有趣的區(qū)別2017/09/18: 雖然說(shuō)內(nèi)科和外科都是相親相愛(ài)的一家人，但是細(xì)數(shù)一下，兩者之間還是有一些有趣的差別，看看網(wǎng)友們是如何總結(jié)的。區(qū)別一：內(nèi)科大夫多話癆皇上：此番遼國(guó)起傾國(guó)之力，那蕭皇后親率三十萬(wàn)大軍南下，諸位愛(ài)卿如何是好？?jī)?nèi)科大臣:啟稟皇上，臣以為還當(dāng)細(xì)細(xì)打探方能定奪，不宜早下決定。究竟是蕭皇后親征，還是南院大王統(tǒng)帥？又或者是其他將領(lǐng)？這分型應(yīng)當(dāng)明確。三十萬(wàn)兵力應(yīng)當(dāng)有所鑒別，據(jù)臣所知遼國(guó)連續(xù)三年大旱，北方更有金人犯境，能聚三十萬(wàn)兵力實(shí)在存疑，打個(gè)問(wèn)號(hào)。遼國(guó)大軍南下，是分兵幾路？每路兵馬幾何？還需完善相關(guān)檢查。至于如何

Western blot，內(nèi)參蛋白選用技巧！2017/09/12: 一、WesternBlot實(shí)驗(yàn)為什么要用內(nèi)參?WesternBlot實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行內(nèi)參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達(dá)量的相對(duì)多少，前提條件是等量的組織細(xì)胞蛋白上樣，才有比較的基礎(chǔ)，特別是表達(dá)量不高時(shí)，上樣量的的差別就很有可能影響結(jié)果的分析。因此，在WesternBlot試驗(yàn)中，進(jìn)行內(nèi)參的檢測(cè)，有以下兩點(diǎn)作用：1、校正蛋白質(zhì)定量、上樣過(guò)程中存在的誤差，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性；2、使用內(nèi)參可以作為空白對(duì)照，檢測(cè)蛋白轉(zhuǎn)膜情況是否、整個(gè)WesternBlot顯色發(fā)光體系是否正常。二、你的內(nèi)參選對(duì)了嗎？作為內(nèi)參

ELISA免疫測(cè)定，實(shí)驗(yàn)技巧！！2017/09/12: ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡(jiǎn)稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問(wèn)世以來(lái)，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。在臨床檢驗(yàn)中主要通過(guò)抗原抗體反應(yīng)檢測(cè)體液中的抗體或抗原性物質(zhì)。ELISA免疫測(cè)定目的是？1.測(cè)定體液中的各種蛋白質(zhì)，包括含量極少的蛋白質(zhì)如甲胎蛋白等；2.測(cè)定激素，包括小分子量的甾體激素等；3.測(cè)定抗生素和藥物；4.測(cè)定病原體抗原，HBsAg、H

1型糖尿病——也許受腸道細(xì)菌影響2017/09/07: 一項(xiàng)新動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的研究發(fā)現(xiàn)，出生后不久就接受抗生素，或者在無(wú)菌的環(huán)境中長(zhǎng)大，小鼠會(huì)發(fā)展出嚴(yán)重的胰腺炎，這是1型糖尿病的前兆。科學(xué)家早已知道，HLA/MHC基因的某些常見(jiàn)變異，能防范各種自身免疫性疾病，特別是1型糖尿病。他們研究出一批小鼠進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，擁有人類白細(xì)胞抗原(HLA)基因和主要組織相容性復(fù)合物(MHC)，由微小的表面蛋白質(zhì)的細(xì)胞作為一些主力抑制免疫系統(tǒng)。然而，這些基因和微小的細(xì)胞蛋白質(zhì)是如何調(diào)節(jié)immune-modulating影響收益率？仍籠罩在神秘之中。現(xiàn)在，哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院的科學(xué)家們

產(chǎn)后抑郁——也許和妊娠糖尿病有關(guān)2017/09/06: 來(lái)自IcahnSchoolofMedicineatMountSinai和KarolinskaInstitutet的研究人員發(fā)現(xiàn)，妊娠糖尿病導(dǎo)致了初次母親產(chǎn)后抑郁（PPD）的風(fēng)險(xiǎn)。這是迄今為止大的同類研究，其中包括70多萬(wàn)名婦女。結(jié)果在“journalDepressionａndAnxiety”雜志上。研究人員還確定，抑郁癥史女性比沒(méi)有診斷過(guò)抑郁癥的母親更有可能體驗(yàn)PPD，數(shù)值達(dá)20倍以上。妊娠糖尿病單獨(dú)增加PPD的風(fēng)險(xiǎn)，孕婦抑郁癥與妊娠糖尿病的病史進(jìn)一步增加了PPD的可能性。“大多數(shù)從業(yè)者認(rèn)為這是

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