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ELISA實(shí)驗(yàn)間接法試劑及試劑配制2023/02/15: ELISA實(shí)驗(yàn)間接法試劑及試劑配制：1.抗原及酶標(biāo)記抗體①抗原：IgG②酶標(biāo)抗抗體：羊抗鼠IgG-HRP2.包被液（CBS）：Na2CO30.8g，NaHCO31.46g，水溶解，定容500ml。3.封閉液（3％BSA+CBS或5％牛奶+CBS）：含3％牛血清白蛋白（BSA）：10mLCBS中加入0.3gBSA。含5％荷蘭牛奶：10mLCBS中加入0.5g牛奶。4.洗滌液（PBST10*）：KH2PO44g，Na2HPO4·12H2O58g，NaCl160g，KCl4g，Tween-2010mL

實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)2023/02/10: 與普通PCR模式相比，實(shí)時(shí)熒光PCR具備幾個(gè)方面的優(yōu)勢(shì)：1、由于實(shí)時(shí)熒光PCR采用封閉的檢測(cè)模式，因此擴(kuò)增產(chǎn)物導(dǎo)致污染的可能性比普通PCR要小得多。2、由于擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測(cè)在PCR擴(kuò)增過(guò)程中同時(shí)進(jìn)行，并且數(shù)據(jù)的采集、分析全部由儀器自動(dòng)完成，因此整個(gè)檢測(cè)所需的時(shí)間比普通PCR要節(jié)省許多。3、實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)模式功能強(qiáng)大，具備定性、定量、突變、多項(xiàng)目等檢測(cè)功能。而普通PCR要完成上述項(xiàng)目需采用不同的技術(shù)平臺(tái)。4、實(shí)時(shí)熒光PCR進(jìn)行定量檢測(cè)時(shí)，其定量線性范圍（5-6logs）比普通PCR（2-3log

簡(jiǎn)述熒光探針?lè)≒CR檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用2023/02/10: 熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒的原理在于PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；剛開(kāi)始時(shí),探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成wan全同步。或者使用熒光染料SYB

ELISA實(shí)驗(yàn)過(guò)程中溫育反應(yīng)中的顯色2023/01/29: 在Elisa實(shí)驗(yàn)步驟中，溫育是的一項(xiàng)要點(diǎn)。而顯色是Elisa中的zui后一步溫育反應(yīng)，此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。Elisa實(shí)驗(yàn)步驟溫育反應(yīng)之顯色：反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi)，陰性孔可保持無(wú)色，而陽(yáng)性孔則隨時(shí)間的延長(zhǎng)而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測(cè)定中，加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測(cè)定的顯色可在室溫進(jìn)行，時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制，有時(shí)可根據(jù)陽(yáng)性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔的顯色情況適當(dāng)縮短或延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，及時(shí)判斷。OPD底物顯色一般在室外

ELISA試劑盒的長(zhǎng)處總結(jié)2023/01/16: ELISA試劑盒的長(zhǎng)處：操作簡(jiǎn)略、迅速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、性價(jià)比高、樣品所需量少。1、操作簡(jiǎn)略、迅速。一切操作過(guò)程，都有圖譜暗示，讓你簡(jiǎn)略明了，不用為研討操作過(guò)程而耽誤時(shí)間。2、靈敏度高。酶是一種有機(jī)催化劑，很少數(shù)的酶即可誘導(dǎo)很多的催化反響，發(fā)生可供調(diào)查的顯色反響景象。咱們的試劑盒完成了在ug、ng、pg水平上對(duì)其進(jìn)行定量。3、特異性強(qiáng)。特異性來(lái)自抗體或抗原的選擇性。選用知名的*裝進(jìn)口抗體抗原，確保的試劑盒質(zhì)量。4、性價(jià)比高，質(zhì)量安穩(wěn)。5、樣品所需量少。

解讀ELISA試劑盒中的抗體2023/01/10: 在ELISA試劑盒中運(yùn)用的抗體可分為多克隆抗體（多抗）和單克隆抗體（單抗）。多抗取白免疫動(dòng)物的抗血清，制備較簡(jiǎn)略，但抗血清成分凌亂，除含針對(duì)抗原（多個(gè)表位）的抗體外，還含有多種其他抗體，親和力和特異性相對(duì)要低于單抗，且制備周期長(zhǎng)，批間差異較大。而單抗僅針對(duì)抗體的單一表位，ELISA試劑盒親和力和特異性均較多抗高，且制備技能老練，產(chǎn)量大，批間差異小，但結(jié)合位點(diǎn)的單一也正是其缺陷之地址，在雙抗體夾心法中，如包被和指示抗體運(yùn)用同一單抗，則由于結(jié)合位點(diǎn)的短少，簡(jiǎn)略構(gòu)成假陰性成果。在運(yùn)用雙單抗一步法時(shí)，應(yīng)

ELISA實(shí)驗(yàn)CV值高原因2023/01/05: 免疫檢測(cè)法的精確性表現(xiàn)為單次實(shí)驗(yàn)孔間（批內(nèi)）的重復(fù)性和多次實(shí)驗(yàn)之間（批間）的重復(fù)性。CV值高則表明精確度低，通常由以下兩個(gè)原因造成：移液技術(shù)和洗滌技術(shù)。一、移液技術(shù)1.移液時(shí)，槍頭應(yīng)對(duì)準(zhǔn)孔，避免接觸孔壁及底部。2.移液后輕輕晃動(dòng)混勻試劑。3.如果您的樣品具有黏性，請(qǐng)預(yù)先潤(rùn)洗槍頭以消除表面張力的影響。吸液時(shí)等待片刻使體積平衡后再取出。4.移液不充分或移液體積不均，說(shuō)明移液器需要校正。必要時(shí)請(qǐng)檢查移液器并重新校正。5.加樣時(shí)，不同的試劑標(biāo)準(zhǔn)品和樣本間都要確保更換槍頭，避免交叉污染。6.確保使用合適的

抗原反應(yīng)與抗體功能分析2022/12/13: 抗原：引起人體產(chǎn)生抗體的物質(zhì)叫做抗原。抗原（antigen，縮寫(xiě)Ag）為任何可誘發(fā)免疫反應(yīng)的物質(zhì)。外來(lái)分子可經(jīng)過(guò)B細(xì)胞上免yi球蛋白的辨識(shí)或經(jīng)抗原呈現(xiàn)細(xì)胞的處理并與主要組織相容性復(fù)合體結(jié)合成復(fù)合物再活化T細(xì)胞，引發(fā)連續(xù)的免疫反應(yīng)。抗原反應(yīng)：所謂抗原的反應(yīng)原性是指能與由它刺激所產(chǎn)生的抗體或致敏淋ba細(xì)胞發(fā)生特異性反應(yīng)。具備免yi原性和反應(yīng)原性兩種能力的物質(zhì)稱為wan全抗原，如病原體、異種動(dòng)物血清等。只具有反應(yīng)原性而沒(méi)有免yi原性的物質(zhì)，稱為半抗原，如青霉素、磺胺等半抗原沒(méi)有免疫。原性，不會(huì)引起免y

有關(guān)于抗原抗體反應(yīng)的純干貨，趕緊收藏！2022/11/25: 抗原抗體反應(yīng)是指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。這種反應(yīng)既可在機(jī)體內(nèi)進(jìn)行，也可以在機(jī)體外進(jìn)行。抗原抗體反應(yīng)的過(guò)程是經(jīng)過(guò)一系列的化學(xué)和物理變化，包括抗原抗體特異性結(jié)合和非特異性促凝聚兩個(gè)階段，以及由親水膠體轉(zhuǎn)為疏水膠體的變化。一、反應(yīng)原理抗體能特異性地識(shí)別相應(yīng)的抗原，并與之結(jié)合。這種結(jié)合在體外也能發(fā)生，這種特性就是許多免疫檢測(cè)方法的基礎(chǔ)。抗原與抗體相互作用是非共價(jià)的，可逆的，其特性符合許多化學(xué)反應(yīng)的基本原理。但因?yàn)榭贵w分子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，以及抗原分子結(jié)構(gòu)的多樣性，使抗原抗體結(jié)合反應(yīng)表現(xiàn)出復(fù)雜

科普菌種各保存方式的活化2022/11/14: 菌種活化就是將保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)是為了得到純而壯的培養(yǎng)物，即獲得活力旺盛的、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物。菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復(fù)壯過(guò)程，因?yàn)楸４鏁r(shí)的條件往往和培養(yǎng)時(shí)的條件不相同，所以要活化,讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境。要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。目前國(guó)際國(guó)內(nèi)常用的菌種保存方法包括：定期移植法、液體石蠟法、沙土管法、真空冷凍干燥法、80℃冰箱凍結(jié)法、液氮超低溫凍結(jié)法。對(duì)于不同的保存方式活化的方式也不同：1、定期移植法的菌種復(fù)蘇較簡(jiǎn)單，直接轉(zhuǎn)接即可

ELISA檢測(cè)共同的階段解說(shuō)2022/11/07: ELISA檢測(cè)是一種免疫檢測(cè)方法，通常用于測(cè)量生物樣品中的抗體或抗原，包括蛋白質(zhì)或糖蛋白。像其他免疫檢測(cè)法一樣，它們依靠抗體與目標(biāo)的結(jié)合來(lái)促進(jìn)檢測(cè)。雖然不同類型的ELISA檢測(cè)有差異，但大多數(shù)檢測(cè)都有一些應(yīng)該考慮共同的階段。1、板包被大多數(shù)ELISA檢測(cè)第一步是將檢測(cè)的第一個(gè)成分與包被板結(jié)合。這通常是通過(guò)被動(dòng)吸附完成的，一個(gè)非特異性的過(guò)程，所以結(jié)果將取決于涂在包被板上的東西。如果使用了含有抗原的樣品，那就需要一個(gè)具有選擇性的包被板，因?yàn)楦鞣N抗原都會(huì)結(jié)合，而不僅僅是那些感興趣的。然而，如果像用于抗

血清鑒別方法及主要作用了解一下2022/11/01: 一、鑒別方法：血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。凝xue塊收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過(guò)程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無(wú)纖維蛋白原，這一點(diǎn)是與血漿zui大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中，血小板釋放出許多物質(zhì)，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加

剖析有關(guān)ELISA試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題2022/10/24: Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)。1.ELISA試劑盒能檢測(cè)什么物種？目前我們的試劑盒檢測(cè)的種屬主要為人，小鼠和大鼠，小部分指標(biāo)涉及猴，兔，豬和雞等特殊種屬。對(duì)于那些命名中帶有特定物種名稱的試劑盒（如人）是專門(mén)針對(duì)此物種的。如果說(shuō)明書(shū)中沒(méi)有指明物種，該試劑盒即在常規(guī)哺

探究PCR反應(yīng)出現(xiàn)假陰性原因2022/10/17: PCR反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)有①模板核酸的制備，②引物的質(zhì)量與特異性，③酶的質(zhì)量及活性④PCR循環(huán)條件。尋找原因亦應(yīng)針對(duì)上述環(huán)節(jié)進(jìn)行分析研究。探究PCR反應(yīng)出現(xiàn)假陰性，不出現(xiàn)擴(kuò)增條帶如下：1、模板：①模板中含有雜蛋白質(zhì)，②模板中含有Taq酶抑制劑，③模板中蛋白質(zhì)沒(méi)有消化除凈，特別是染色體中的組蛋白，④在提取制備模板時(shí)丟失過(guò)多，或吸入酚。⑤模板核酸變性不*。在酶和引物質(zhì)量好時(shí)，不出現(xiàn)擴(kuò)增帶，極有可能是標(biāo)本的消化處理，模板核酸提取過(guò)程出了毛病，因而要配制有效而穩(wěn)定的消化處理液，其程序亦應(yīng)固定不宜隨意更改。2

實(shí)驗(yàn)干貨：培養(yǎng)基概述與滅菌方法2022/10/05: 培養(yǎng)基（Medium）是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有水、氮源、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）、碳源、生長(zhǎng)因子（維生素、氨基酸、堿基、抗菌素、色素、激素和血清等）等。培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培養(yǎng)基），較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管，均改制成粉末。培養(yǎng)基由于富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，

P物質(zhì)受體抗體實(shí)驗(yàn)原理2022/09/19: P物質(zhì)受體抗體實(shí)驗(yàn)原理：1、特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞，通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而，抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。2、活補(bǔ)體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。3、結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答。4、可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形

ELISA試劑盒五大種類2022/09/05: 以下介紹ELISA試劑盒五大種類：一、生物原裝ELISA試劑盒以及各類國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒、細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒如白介素、選擇素、集落刺激因子，腫瘤壞死因子，干擾素，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子，趨化因子，細(xì)胞因子受體，粘附分子，生長(zhǎng)因子，凋亡因子等。二、食品安全檢驗(yàn)ELISA試劑盒指食品中的激素、藥物、霉菌毒素、過(guò)敏原殘留、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測(cè)試劑盒，以及微生物、維生素等的檢測(cè)產(chǎn)品。包括植物病毒、細(xì)菌、真菌、植物激素和轉(zhuǎn)基因作物的農(nóng)業(yè)診斷試劑盒，以及動(dòng)植物疾病診斷類如豬、牛、羊、馬等家畜和禽類以及寵物類檢測(cè)試劑盒。

G蛋白偶聯(lián)受體25抗體的制備2022/08/30: G蛋白偶聯(lián)受體25抗體的制備：1.免疫原：普通的大分子蛋白，通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。2.免疫動(dòng)物：常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。3.免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

影響ELISA檢測(cè)的質(zhì)量的原因2022/08/22: ELISA測(cè)定的陽(yáng)性判斷值,通常是將大量陰性和陽(yáng)性人群的測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后確定的,其確定依據(jù)為判斷結(jié)果的假陽(yáng)性和假陰性率低。在陽(yáng)性判斷值周圍一定范圍內(nèi)之外的測(cè)定結(jié)果可歸為可疑,亦即ELISA測(cè)定的“灰區(qū)”。“灰區(qū)”的大小可用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法確定。測(cè)定結(jié)果處于“灰區(qū)”的樣本,可通過(guò)確認(rèn)試驗(yàn)或追蹤檢測(cè)來(lái)確定到底是陽(yáng)性還是陰性ELISA“灰區(qū)”是把定量分析的正常值范圍引入定性分析而建立的概念。灰區(qū)的設(shè)置有二種:(1)CO×(1±C),C為該試劑的批內(nèi)C(一般在15%～20%間);(2)CO±2S,S為做

細(xì)胞生物學(xué)試劑使用注意事項(xiàng)2022/08/15: 細(xì)胞生物學(xué)試劑使用注意事項(xiàng)：1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影

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