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?防止RNA酶污染的措施2022/08/08

防止RNA酶污染的措施:1.所有的玻璃器皿均應在使用前于180℃的高溫下干烤6hr或更長時間。2.塑料器皿可用0.1%DEPC水浸泡或用氯仿沖洗（注意：有機玻璃器具因可被氯仿腐蝕，故不能使用）。3.有機玻璃的電泳槽等，可先用去污劑洗滌，雙蒸水沖洗，乙醇干燥，再浸泡在3%H2O2室溫10min，然后用0.1%DEPC水沖洗，晾干。4.配制的溶液應盡可能的用0.1%DEPC水，在37℃處理12hr以上。然后用高壓滅菌除去殘留的DEPC。不能高壓滅菌的試劑，應當用DEPC處理過的無菌雙蒸水配制，然后經

抗原抗體的不同與抗原抗體反應的特點2022/08/01

抗原，是指可以誘發免疫反應的物質，是可以誘導人體形成抗體的一個物質。是指能夠刺激機體產生（特異性）免疫應答，并能與免疫應答產物抗體和致敏淋巴細胞在體內外結合，發生免疫效應（特異性反應）的物質。抗原的基本特性有兩種，一是誘導免疫應答的能力，也就是免疫原性，二是與免疫應答的產物發生反應，也就是抗原性。抗體，是指機體由于抗原的刺激，而產生的具有保護性作用的一個蛋白質。一般抗體都是由漿細胞分泌，被免疫系統用來鑒別、中和外來物質。也可以這么理解，抗原和抗體是一對的。抗原是外來物質，刺激機體產生抗體，而這個

ELISA標準?加樣方法2022/07/25

酶聯免疫吸附測定（ELISA）因其具有敏感性高、特異性強等優點，被廣泛應用于臨床檢測中的各種抗原和抗體的測定。盡管ELISA操作簡單，但是小實驗里也蘊含著大文章，ELISA操作各個環節對實驗的檢測效果影響較大，稍不注意就會產生假陽性或假陰性的結果。因ELISA的靈敏度較高，則應該按規定將血清稀釋至適當的倍數，以降低非特異性反應，使特異性的抗原抗體反應充分體現出來。加樣品時，單孔用量要求：≥20ul/指標，如需要做2個復孔則血量≥60ul/指標。如果用量充足，最好提供50ul/孔/指標。具體用量也

ELISA試劑盒實驗繪制標準曲線注意事項2022/07/18

ELISA試劑盒實驗繪制標準曲線注意事項：1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的，所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事，否則后面的實驗結果無從談起。2、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內，包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度最陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內。3、最好采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度，這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現

PCR引物設計的幾個原則2022/07/12

引物設計的原則：1、引物長度：一般為15-30bp，常用的是18-27bp，但不能大于38，因為過長會導致其延伸溫度大于74℃，即Taq酶的最適溫度。2、引物的特異性：引物與非特異擴增序列的同源性不要超過70%或有連續8個互補堿基同源。3、序列Tm值：引物的Tm值一般控制在55-60度,盡可能保證上下游引物的Tm值一致,一般不超過2度。退火溫度=4×(G+C)+2×(A+T)-(5～8)4、G+C含量：有效引物中(G+C)的比例為40-60%，過高或過低都不利于引發反應。上下游引物的GC含量不能

預防化學試劑變質有效辦法2022/07/05

化學試劑在貯存、運輸和銷售過程中會受到溫度、光輻照、空氣和水份等外在因素的影響，容易發生潮解、霉素、變色、聚合、氧化、揮發、升華和分解等物理化學變化，使其失效而無法使用。因此要采用合理的包裝，適當的貯存條件和運輸方式，保證化學試劑在貯存、運輸和銷售過程中不變質。對一些對貯存和運輸有特殊要求的應按特殊要求辦理。有些化學試劑有一定的保質期，使用時一定要注意。下面總結預防化學試劑變質有效辦法：1、密封這是*普遍通用的方法。試劑瓶的材料和密封程度應根據試劑性質而定。如：強腐蝕的“三酸”和液溴，可用帶磨口

一抗的選擇需要考慮方面2022/06/28

一抗選擇的好壞對免疫組化實驗的至關重要，一抗盡量選擇單克隆抗體，還要注意其抗體來源（兔抗、鼠抗或者其他）要與二抗匹配。一抗的選擇要點和技巧1、單克隆和多克隆抗體的選擇由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標明確地與單一的特異抗原決定簇結合，就像導dan精確地命中目標一樣。另一方面，即使是同一個抗原決定簇，在機體內也可以由好幾種克隆來產生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應中，一般單克隆抗體特異性強，但親和力相對小，檢測抗原靈敏度相對就低；而多克隆抗體

細胞生長緩慢具體的原因總結2022/06/21

細胞生長緩慢的常見原因:1、培養基可能缺乏細胞生長所需的某種因子。通常情況下，當小伙伴購買細胞，并沒有按照ATCC或國內細胞庫推薦的方法制備培養基，使用實驗室兄弟姐妹使用的培養基來培養細胞。解決方法一般是按照推薦的方法制備培養基，或直接購買培養細胞的培養基。2、細菌、支原體、真菌等污染:雖然培養基中通常添加雙抗體(青霉素和鏈霉素)，但如果無菌操作觀念不強，仍有可能造成污染。處理方法:如果有冷凍細胞，可以丟棄污染細胞。當然，丟棄并不是隨意的，扔進垃圾桶。應按照實驗室生物安全規定進行。然后復蘇培養物

胎牛血清和新生牛血清三方面差異2022/06/14

血清是一種純天ran培養基，含有細胞生長繁殖所需的多種營養成分，如蛋白質、多肽等，多用于細胞培養、生物制品及診斷試劑的。血清的主要成分是蛋白質，血清的組成成分與含量常常與供血動物性別、年齡、生理條件和營養條件有關。那常見胎牛血清和新生牛血清差異：一、取血年齡：牛血清按照牛取血時間或牛齡可進行區分。胎牛血清（FoetalBovineSerum，簡稱FBS）指的是取自未出生，母牛剖腹得來的胎牛。國產胎牛血清（并無明確定義，但通常以此稱）的指的是出生4-6小時，且未進行哺乳（unsuckled）進食的

保證校準的緩沖液準確性注意事項2022/06/07

用于校準的緩沖液是非常精確的溶液，擁有固定的數值和精度。緩沖液瓶開封后，為了保證校準的準確性，要注意下面事項：1.第一次使用緩沖液時，在包裝上標明日期，保證緩沖液包裝的密封性。2.不要把使用過的緩沖液倒回原瓶，或把不同的緩沖液混合在一起。3.常溫下儲存緩沖液，儲存時避免陽光直射4.校準前請清洗電極，不要在原瓶中直接校準5.絕對不要使用過期的或污染的緩沖液6.緩沖液到期應及時更換新的緩沖液

分析鑒定單克隆抗體的性質常見的方法2022/05/31

當獲得多個雜交瘤細胞株時，要了解哪一株是*適用的，則一定要通過各種鑒定，分析常見的方法有：一、特異性測定把與相應抗原有關的物質同McAb進行多種免疫學檢測，鑒定McAb的特異性。這直接關系到McAb應用的可靠性。二、抗體效價測定效價以腹腔積液或培養液的稀釋度表示，稀釋度越高，則抗體效價也越高。在凝集反應中，腹腔積液效價可達5萬以上；在ELISA中，腹腔積液效價可達100萬以上。如ELISA效價低于10萬，用于診斷測定將不會達到很高的敏感度，應重新制備。三、Ig類型測定通常以免抗小鼠Ig類及亞類抗

單克隆抗體技術具體過程2022/05/23

單克隆抗體技術B淋巴細胞在抗原的刺激下，能夠分化、增殖形成具有針對這種抗原分泌特異性抗體的能力。B細胞的這種能力和量是有限的，不可能持續分化增殖下去，因此產生免疫球蛋白的能力也是極其微小的。將這種B細胞與非分泌型的骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，再進一步克隆化，這種克隆化的雜交瘤細胞是既具有瘤細胞的無限分裂的能力，又具有產生特異性抗體的B淋巴細胞的能力。將這種克隆化的雜交瘤細胞進行培養或注入小鼠腹水內即可獲得大量的高效、單一的特異性抗體。這種技術即稱為單克隆抗體技術。單克隆抗體技術具體過程：1、免

分析細胞狀態不好原因2022/05/18

分析細胞狀態不好原因：一、胰酶消化過度在用胰酶消化細胞使其不貼壁的時候，如果消化時間過長，會導致細胞膜表面蛋白也被破話，嚴重者可致細胞破碎、死亡。所以胰酶消化不宜過久。如果消化了好久（具體消化時間視細胞而定）在鏡下看還有很多細胞貼壁，可能是胰酶消化力弱。增強胰酶消化能力的方法：消化前用PBS洗以去除血清中的各種蛋白；在胰酶中加入EDTA；在消化前胰酶37攝氏度預熱。二、傳代比例太低細胞在培養基中生長的時候，除了外源營養物質，其自身也會分泌促進生長的物質。如果一個皿中細胞數量太少，細胞分泌的營養物

豬特定基因序列PCR檢測試劑盒操作說明2022/05/17

豬特定基因序列PCR檢測試劑盒操作說明石榴樹在淡淡的晨霧中，顯得特別精神，石榴果仿佛知道了秋天的到來，它笑了，笑得那樣地欣慰、可愛，紅里透亮的牙齒也露了出來!接下來介紹豬特定基因序列PCR檢測試劑盒操作說明特點優勢：1.特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到*。2.重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為*。3.靈敏性：該

分享實驗室化學試劑保存辦法2022/05/09

化學試劑既要保管好試劑不使蛻變或損耗，又要留意危險性試劑的du害效果，防止火警、損害以及放射性污染等事端的發作。想要試驗做的好，那么化學試劑一定要保存的好，萬一出現個什么不小心，那不便是浪費了化學試劑，有耽誤了自己做試驗的時刻，那么以下便是今日為大家總結的試驗室中化學試劑怎么正確保存的辦法。一、避光其實在試驗室中許多化學試劑見強光都極易揮發蛻變，所以為避免試劑遭到光的輻射，應選用棕色玻璃瓶，外用黑紙包裹，并儲藏于暗室或遮光的試劑柜中。避光保存適用于能進行光化學反響的試劑，如胺類、酚類、醛類等。二

小鼠腦腸肽elisa檢測試劑盒操作要點2022/05/05

小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)elisa檢測試劑盒操作要點:1）標本的采取和保存：可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經預處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標本；2）試劑的準備：所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液；3）加樣：一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。4）保溫：ELISA中一般有兩次抗原抗體反應

免疫熒光方法背景染色較深的原因2022/04/24

免疫熒光方法是最早建立的免疫組織化學技術。它利用抗原抗體特異性結合的原理先將已知抗體標上英光素以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后即會發出一定波長的熒光從而可確定組織中某種抗原的定位進而還可進行定量分析。由于免疫熒光技術特異性強、靈敏度高、快速簡便所以在臨床病理診斷、檢驗中應用較廣。那實驗背景染色較深的原因有哪些?1、抗體濃度過高一抗濃度過高是常見的原因之一。解決辦法是每次使用新抗體前應當對其工作濃度進行測試，使每一抗體個體化找到適

常見ELISA試劑盒有哪些2022/04/19

Elisa試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。下面是常見ELISA試劑盒如下：1、細胞因子檢測試劑盒：如白介素、選擇素、集落刺激因子，腫瘤壞死因子，干擾素，轉化生長因子，趨化因子，細胞因子受體，粘附分子，生長因子，凋亡因子等等。2、自身免疫檢測elisa試劑盒：如甲狀腺,鹽水可提取核抗原抗體（ENA）,抗核抗體,DNA,抗心磷脂抗體,類風濕因子,循環免疫復合物,抗胰島細胞抗體,胰蛋白酶原,

預防細胞培養過程中發生污染的辦法2022/04/13

預防是防止細胞培養過程中發生污染的最好辦法。只有預防工作做在前，才能將發生污染的可能性降到最小程度。1、添加抗生素2、從物品、用品消毒滅菌著手細胞培養所用物品清洗、消毒要*，各種溶液滅菌除菌要仔細，并在無菌試驗陰性后才能使用。操作室及剩余的無菌器材要定期清潔消毒滅菌。3、從操作者做起a.進無菌室前要用肥皂洗手，按規定穿隔離衣。工作開始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。b.操作者動作要輕，必須在火焰周圍無菌區內打開瓶口，并將瓶口轉動燒灼。操作時盡量不要談話，若打噴嚏或咳嗽應轉向背面。c.

淺析ELISA四種常見檢測方法2022/04/07

1、直接ELISA將抗原固定于ELISA板上，然后用酶標抗體直檢測抗原。相較于其它類型的ELISA實驗，直接ELISA實驗步驟少，檢測速度快，不需要用到二抗，避免了交叉反應，測定結果不容易出錯。但是由于直接ELISA的抗原不是特異性固定的，樣本中的靶蛋白及其他雜質蛋白都會與ELISA板結合，實驗背景會比較高。而且直接ELISA每種靶蛋白都需要準備能夠與其特異性結合的一抗，實驗不太靈活。另外由于沒有使用二抗，信號沒有被放大，降低了測定的靈敏度。2、間接ELISA先將抗原結合到ELISA板上，隨后分