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在試驗中ELISA試劑盒的條件挑選2023/11/02

在ELISA試劑盒中，進行各項試驗條件的挑選是很重要的，其間包括:（1）固相載體的挑選：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。現在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不論何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一試驗條件下進行反響，調查其顯色反響是否均一性，據此判明其吸附功能是否良好。（2）包被抗體（或抗原）的挑選：將抗體（或抗原）吸附在固相載體外表時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時刻及其蛋

菌種保存的幾種常用方法2023/10/31

微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于zui不活躍或相對靜止的狀態，才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素，所以，菌種保藏方法雖多，但都是根據這三個因素而設計的。保藏方法大致可分為以下幾種：1.傳代培養保藏法又有斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養等（后者作保藏厭氧細菌用），培養后于4—6℃冰箱內保存。2.液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養的變相方法，能夠適當延長保藏時間，它是在斜面培養物和穿刺培養物上面覆蓋滅

電泳緩沖液的特點及作用有哪些？2023/10/24

電泳緩沖液是核酸、蛋白質凝膠電泳系統的一個重要組成，是電泳場中的導體，也是維持電泳系統恒定pH值的必要條件。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。電泳緩沖液的特點：1.TAE是使用緩沖系統。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質量(TBE中電泳時測出的相對分子質量會大于實際分子質量)，且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%，電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果，此外，回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統進行電泳。TAE的缺點是

ELISA實驗操作要點：酶聯免疫吸附試驗（ELISA）四大操作要點2023/10/18

1標本的采取和保存可用作elisa測定的標本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液)，有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清自然凝固、血k收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應用。血清標本可按常

ELISA（酶聯免疫吸附）原理及步驟詳解2023/10/12

1.原理：免疫分析是一種利用特定抗體與抗原或半抗原發生的高選擇性高特異性識別和結合原理，對待測抗體或者抗原進行分析測定的方法，酶聯免疫吸附分析（下稱ELISA）是免疫分析的一種，分三個部分組成：免疫識別，信號輸出和數據處理。2.步驟：免疫識別是在聚苯乙烯制成的96孔板上包被抗體，而后利用抗體識別待測的抗原（通常是疾病的蛋白質生物標記物，病毒，細菌等等，從復雜待測液中將抗原吸附到96孔板表面。接著用帶有辣根過氧化酶（HorseradishPeroxidase,HRP）、熒光或放射性標記的抗體通過直

蛋白免疫印跡的基本原理及操作步驟2023/10/11

基本原理：免疫印跡（WesternBlot）采用的是聚丙/烯酰胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質，“探針”是抗體，“顯色”用標記的二抗。SDS-PAGE可對蛋白質樣品進行分離，轉移到固相載體——例如硝酸纖維素薄膜（NC）上。固相載體可以吸附蛋白質，并保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。轉移后的NC膜就稱為一個印跡（blot），用蛋白溶液（如5%BSA或脫脂奶粉溶液）處理，封閉NC膜上的疏水結合位點。用目標蛋白的抗體（一抗）處理NC膜——只有待研究的蛋白質才能與一抗特異結合形成抗原抗體復合物，這樣

如何挑選一款優質的凍存管？2023/10/07

凍存管主要應用于低溫運輸與儲存組織或細胞樣本，常用在生物研究及醫學領域。1.看材質一般凍存管都是由無細胞毒性的材料制備的，實驗室常用的材質有塑料和玻璃。但因為玻璃材質的凍存管不能用在高速或者超速離心機上，所以用塑料聚丙烯材質的凍存管的比較多。聚丙烯的化學和溫度穩定性非常好，液氮的氣體狀態環境下，可耐低溫至零下187℃。2.看構成凍存管一般都由管帽、管體構成，分為內旋蓋和外旋蓋凍存管。如果樣本要液氮氣相中保存，就用內旋凍存管，帶硅膠墊的；如果樣品要放在機械設備，比如冰箱里保存的話，就用外旋凍存管，

緩沖液的原理2023/09/25

由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用，是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當向這種溶液中加入一定量的強酸時，H+離子基本上被A-離子消耗：所以溶液的pH值幾乎不變；當加入一定量強堿時，溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。在緩沖溶液中加入少量強酸或強堿，其溶液pH值變化不大，但若加入酸，堿的量多時，緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說明它的緩沖能力是有一定限度的。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關。0.1mol·L-1HAc和0.1mol·L-1NaAc

細胞的多樣性在生物體中起到了什么樣的作用？2023/09/20

1、組成和結構細胞是生物體的基本結構單位，它們在組成和結構上具有多樣性。不同類型的細胞具有不同的形態、大小和內部結構。例如，動物細胞和植物細胞的結構存在差異，而同一類細胞內部的組織結構也會有細微的變化。2、功能和特化細胞在生物體內承擔各種不同的功能和任務。不同類型的細胞具有特定的功能和特化。例如，神經細胞負責傳遞信號，肌肉細胞負責收縮，血細胞負責輸送氧氣等。這種細胞的功能和特化使得生物體能夠協調運作。3、分工和協作細胞之間具有分工和協作的關系。不同類型的細胞通過相互配合和協同工作來完成生物體的各

細胞篩網的使用方法2023/09/15

細胞篩網（產品別名：細胞過濾網）常用于器官培養、組織轉運或移植，尤其適用于干細胞和原代細胞過濾，常與流式細胞儀配套使用，是流式細胞分選實驗。細胞過濾器使用堅固的尼龍網制作，主要分為三個篩孔型號：100um，70um，40um，可滿足不同細胞大小的過濾操作。那么怎樣才是正確的細胞篩網使用方法？讓我們一起來看看！使用方法：1.準備濾器：選擇一個合適的細胞篩網，并根據需要在濾器上加上濾紙，使其更容易使用。2.準備細胞懸液或培養基：將細胞懸液或培養基倒入容器中，并加入需要的藥物、酶、抗生素等。3.過濾細

細胞劃痕實驗的所需材料、實驗步驟2023/09/13

所需材料1、儀器：細胞計數儀、臺式離心機、CO2培養箱、倒置顯微鏡、移液槍、移液管移液器、4℃和-20℃冰箱、6孔培養板、直尺、maker筆。2、試劑：細胞適配培養基、FBS、PBS、胰酶、樣本溶劑。實驗步驟1、劃線：先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻的劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔，每孔至少穿過5條線；2、鋪板：處于對數生長期的細胞，胰蛋白酶消化成單細胞懸液，接種于6孔培養板；細胞鋪板6w/孔，接種原則為過夜后融合率達到100%，每孔最終的培養基總量2mL；3、細胞

如何使用超濾管？該如何操作？2023/09/12

1、預處理：新超濾管：使用前用純水浸泡，冰箱預冷10min。然后將水倒出，置于冰上預冷2-5min，加樣。舊超濾管：倒出管內的乙醇浸泡液，用純水沖洗干凈10遍（注意水流速盡量平緩，防止沖破濾膜），置于冰上預冷2-5min，加樣。2、加樣：如超濾管中有少許殘留水可將超濾管內管倒置1000×g離心1min，移液槍移取適量樣本加入超濾管中。3、離心：配平，12000×g離心（15-30min），等達到目的轉速后方可離開。4、樣本收集：外管濾液為除去部分蛋白的樣本上清，如需取濃縮后樣本用于其他實驗，則另

透析袋的使用方法的詳細介紹2023/09/08

為防干裂，出廠前透析袋一般都經10%的甘油處理，透析袋中含有微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質，它們對蛋白質和其他生物活性物質有害，用前必須除去。新購進的普通型透析袋必須經過處理才能使用。處理方法如下。方法一：把透析袋剪成適當長度（10-20cm）的小段。在大體積（500ml）的2%（w/v）的碳酸氫鈉和1mmol/LEDTA2Na（pH=8.0）中將透析袋煮沸10min。用蒸餾水清洗透析袋。放在500ml的1mmol/LEDTA2Na（pH=8.0）中將之煮沸10min。冷卻后，置于

凍存管為什么會爆炸？如何避免？2023/09/05

在實驗過程中我們可能會用到凍存管對樣品進行凍存，但是在用液氮進行凍存的時候經常會發生凍存管爆炸的事件，這不僅會使實驗樣品損失，甚至可能會對實驗人員造成傷害，那么該如何避免這種情況發生呢？原因：首先，凍存管都是不能直接放到液氮的液相中進行保存的。因為常見凍存管的管身和管蓋材質不一樣，在進行冷凍時產生的熱脹冷縮速率也不同。如果將凍存管直接放到液相之中，就可能會讓液氮流到管內。在下一次將樣品進行復蘇時，把凍存管放入37℃的水浴當中，管內的液氮迅速氣化膨脹，但是氣體不能及時從管內跑出去，所以導致凍存管爆

抗體的選擇和保存指南2023/08/30

一、怎樣選擇適合你實驗需要的抗體？1.一抗選擇要點（1）確定抗體的名字，注意中英文名字、它名、亞型等信息。（2）確定你的實驗類型，Elisa，WB，IHC，ICC，還是FACS。一般抗體的說明書都會列出該抗體經驗證過適用于何種實驗的類型，如果抗體說明書沒有提及的應用類型，并不意味著該抗體不適用于此種分析應用類型，而僅是說明尚未經過此種實驗驗證，請根據說明書列出的已驗證的類型來選擇適合你實驗的抗體。（3）確定實驗樣本的種屬，Human，Mouse，還是Rat。一般抗體說明書都列出該抗體經試驗驗證過

即用型透析袋使用方法2023/08/29

一、儲存條件：透析膜浸泡在儲存液中，封放置于4-37°C之間環境，有效期3年。二、使用方法：1、把透析袋剪成適當長度（10-20cm左右）的小段。2、用去離子水浸泡10分鐘左右，再用去離子水膜內沖洗3次。3、不使用的透析膜放回儲存液中，密封保存，接觸透析膜過程中必須戴手套。4、使用時，一端用透析袋夾子夾緊，灌滿水后，用手指適當加壓，檢查不漏，方可裝入樣品。通常要留三分之一至一半的空間，以防透析過程中，袋外的水和緩沖液過量進入袋內將袋漲破。裝完樣品后，加樣端用夾子夾緊袋口，可在袋內放一玻璃珠，以使

細胞爬片（玻片）的用前準備2023/08/25

細胞爬片又名玻片，是指讓玻片浸在細胞培養基內，細胞在玻片上生長，主要用于組織學，免疫組織化學，細胞涂片，原位雜交等。除了在實驗中的使用，實驗前的準備也十分重要，讓我們一起來看看使用前需要做哪些準備吧！用前準備：1、蓋玻片的選擇爬片可用一般的蓋玻片，也可用專用細胞爬片，價格比較昂貴但是細胞貼壁牢固，拍出照片效果好；2、爬片的剪裁可根據自己的需要，到染色時再將之切開，這樣既保證了細胞均一性，又可同時做幾個指標的染色剪裁成合適大小，置于6孔板、12孔板或24孔板；3、爬片的使用前處理將剪裁好的爬片，置

細胞凍存原理及注意事項有哪些？2023/08/23

原理：1.當溫度低至-70℃時，細胞內的酶活性全部停止，代謝活動停止，故實現長期保存的目的。2.隨著溫度降低，細胞內外的水分都會結晶，所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞，從而引起細胞死亡，特別是0~-20℃的階段，冰晶呈針狀，及其引發細胞損傷。在不加任何保護劑條件下直接凍存細胞時，細胞內和外環境中的水都會形成冰晶，能導致細胞內發生機械損傷、電解質升高、滲透壓改變、脫水、pH改變、蛋白變性等，能引起細胞死亡。3.常見的冷凍保護劑是甘油或二甲基亞砜（DMSO）。DMSO能快速穿透細胞膜進入細胞，

ELISA試劑盒組成與常見ELISA試劑盒分類2023/08/21

ELISA試劑盒主要的組成成份如下：(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)；(2)C的抗原或抗體(結合物)；(3)酶的底物；(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標準品和控制血清(定量測定中)；(5)結合物及標本的稀釋液；(6)洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；(7)酶反應終止液，常用的HRP反應終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的最終體積而異，在板式ELISA中一般采用2mol/L。常見的ELISA試劑盒一、食品安全檢驗ELISA試劑

CCK-8細胞增殖實驗介紹2023/08/18

1）制備細胞懸液，計數。2）在96孔板中接種細胞懸液，每孔約100μl，同樣的樣本可做3個重復。3）將培養板放入培養箱中預培養一段時間（37℃,5%CO2），細胞貼壁需要大約2-4h，如果是懸浮細胞，該步驟可以省去。4）每孔各加入10μlCCK-8溶液，由于加入的CCK-8量比較少，可能會因試劑沾在孔壁上而帶來誤差，建議在加完試劑后輕輕晃動培養板以幫助混勻，或者直接配置含10%CCK-8的培養基，以換液的形式加入。另外注意，加樣的過程中盡量不要產生氣泡。5）將培養板放入培養箱中孵育1-4h。因為