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伊萊博生物科技(上海)有限公司
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蛋白質翻譯后修飾2024/08/09
項目背景:蛋白質翻譯后修飾(Post-TranslationalModification,PTM)是指在翻譯后,蛋白質在其氨基酸鏈上經歷的化學修飾,這些修飾可以影響蛋白質的功能、活性、穩定性和細胞定位。PTM是細胞調控的重要機制,分別通過添加、去除或更換不同的化學基團來調節蛋白質的性質。常見的PTM包括:磷酸化、糖基化、甲基化、乙?;?、泛素化等。其中磷酸化在細胞內信號轉導、代謝調節、細胞周期控制等生物過程起著關鍵作用。案例展示:人體內蛋白質磷酸化存在組織特異性
小鼠腹腔巨噬細胞的分離方法2024/08/02
1.C57BL/6小鼠脫頸處死。2.腹部剃毛,75%酒精消毒。3.用注射器吸取10mL冷的生理鹽水,提起小鼠腹中部的皮膚和腹膜,讓針頭從提取處穿刺進入小鼠腹腔,緩緩推注生理鹽水。4.輕揉小鼠腹部數次,靜置3min,使液體在腹腔內充分流動。5.用鑷子提起下腹皮膚,使與腹膜分開,在鑷子提取處將皮膚剪開一個小口,再撕開整個腹部皮膚,使腹膜暴露。6.將注射器針頭插入縫隙處抽取腹腔液。7.將腹腔液在250g下離心5分鐘。8.將細胞重懸在含有10%FBS的RPMI1640培養基中,并在37°C、5%CO2的
小動物核磁共振成像技術2024/07/23
一、小動物核磁共振成像原理核磁共振成像(NuclearMagneticResonanceImaging,簡稱NMRI),也稱磁共振成像(MagneticResonanceImaging,簡稱MRI),依據所釋放的能量在物質內部不同結構環境中不同的衰減,通過外加梯度磁場檢測所發射出的電磁波,即可得知構成這一物體原子核的位置和種類,據此可以繪制成物體內部的結構圖像。二、小動物核磁共振成像特點1.無電離輻射性(放射線)損害;2.無骨性偽影;3.多方向(橫斷、冠狀、矢狀切面等)、多參數快速成像;4.高度
小鼠睪丸網注射方法2024/07/19
小鼠睪丸網注射方法1.麻醉C57BL/J小鼠。2.術野備用,碘伏消毒。3.在恥骨聯合上方做1.5cm的切口,拉出一側睪丸和附睪。4.在體視顯微鏡下,將抽好轉染液的胰島素針度的角度插進睪丸網與輸出管連接的凸起處,緩慢將轉染液注入睪丸生精小管中。5.每側睪丸網注射50ul轉染液,使得睪丸表面大部分生精小管變藍。6.注射后,停針2min。實驗服務:1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq3.蛋白
10-12周齡雌性大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養2024/07/08
1.10-12周齡雌性SD大鼠,皮下注射孕馬血清促性腺激素(PregnantMareSerumGonadotropin,PMSG)60IU,48h后頸椎脫臼處死。2.大鼠浸入75%乙醇浸泡5-10分鐘,轉移到通風柜中的解剖盤中。3.在距離大鼠脊柱1cm、肋下1cm的交叉位置剪開皮膚、肌肉,可見白色的脂肪組織,拉出脂肪組織,可見到粉紅色的卵巢,摘除卵巢。4.取卵巢放入預冷的含雙抗的緩沖液中,用緩沖液清洗卵巢三次,去除周圍組織及表面包膜。5.在解剖顯微鏡下用1mL的注射器刺破卵泡,釋放顆粒細胞。6.
3-4周齡雌性大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養2024/06/28
1.3-4周齡雌性SD大鼠,皮下注射孕馬血清促性腺激素(PregnantMareSerumGonadotropin,PMSG)60IU,48h后頸椎脫臼處死。2.大鼠浸入75%乙醇浸泡5-10分鐘,轉移到通風柜中的解剖盤中。3.在距離大鼠脊柱1cm、肋下1cm的交叉位置剪開皮膚、肌肉,可見白色的脂肪組織,拉出脂肪組織,可見到粉紅色的卵巢,摘除卵巢。4.取卵巢放入預冷的含雙抗的緩沖液中,用緩沖液清洗卵巢三次,去除周圍組織及表面包膜。5.在解剖顯微鏡下用1mL的注射器刺破卵泡,釋放顆粒細胞。6.將懸
小鼠脾臟CD8+T細胞的磁珠分選2024/06/20
一、制備脾臟單細胞懸液8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血,無菌分離脾臟,于70um濾網上研磨收集脾細胞,過濾、離心,再以RPMI-1640wan全培養液重懸。二、磁珠標記1.細胞計數為8×107/mL。2.400×g離心4分鐘,去除上清。3.每107個細胞總量使用40μL緩沖液重懸。4.每107個細胞總量添加10μLCD8+T細胞生物素抗體混合物。5.混勻,4℃孵育5分鐘。6.每107個細胞加入2mL緩沖液洗滌細胞,400×g離心4分鐘,去上清。7.每107個細胞添加80μL緩沖液。8.每107
整體課題實驗的意義2024/06/18
一、整體課題實驗的意義在醫學領域,每一次的突破都離不開深入的實驗研究。而整體課題實驗,作為一種綜合性、系統性的研究方法,正日益受到科研人員的青睞。它不僅能夠深入剖析疾病的發病機制,還能為藥物的研發提供有力支持,為醫學事業的進步注入新的活力。整體課題實驗,顧名思義,是一種將多個相關課題整合在一起,進行系統性研究的實驗方法。它突破了傳統單一課題研究的局限性,通過整合不同領域的知識和技術,形成一個更為完整、全面的研究體系。這種方法的出現,不僅提高了研究效率,也為科研人員提供了更廣闊的思路和視角。在整體
什么是醫學實驗服務?2024/06/18
一、醫學實驗服務的意義醫學實驗服務是生命科學研究中的一環。無論是新藥研發、疾病診斷,還是基因測序、細胞培養,都離不開醫學實驗服務的支持。這些服務提供了專業的實驗技術、設備和人員,為科研人員提供了強大的后盾,使得他們能夠更專注于探索生命科學的奧秘。醫學實驗服務的優勢在于其專業性和高效性。專業的實驗團隊具備豐富的經驗和技能,能夠確保實驗的準確性和可靠性。他們熟悉各種實驗方法和技巧,能夠根據研究需求制定合適的實驗方案。同時,醫學實驗服務還具備高效性,能夠快速響應科學家的需求,提供及時的技術支持和數據分
MPTP誘導的帕金森氏模型2024/06/17
藥品:1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine(MPTP)是一種廣泛使用的化學物質,用于在動物體內誘導類似于PD的狀態,注射MPTP的小鼠已被廣泛接受為PD模型。動物:成年雌性Balb/c小鼠,10周齡。造模:成年雌性Balb/c小鼠,連續7天給予MPTP(15mg/kg/天),腹腔注射。模型的評價:1.曠場活動測試(Openfieldlocomotionactivitytest):曠場(45cm×45cm×25cm)準備好,將小鼠放入盒子中,熟悉
大鼠腦缺血再灌注損傷模型2024/06/17
模型:麻醉大鼠,然后在頸部中線切開一個切口,暴露頸外動脈和頸內動脈,用無菌縫合線結扎,血管夾夾住頸內動脈。隨后在頸總動脈上切口,然后插入線栓。2h后,大鼠進行再灌注。模型大鼠成功構建的標準:大鼠出現癥狀如偏癱,對側前肢下垂和站立不穩。Bederson評分在1-3分,48小時內沒有死亡,就認為模型成功。文獻上用的是2-3分的模型。優點:無需開顱,創傷較??;缺血部位相對固定,可控性好;可實現腦缺血后再灌注,是理想的標準局灶性腦缺血動物模型。動物選擇:目前多選用SD大鼠??紤]大鼠雌激素水平對腦缺血損傷
小鼠脾臟單細胞懸液的制備方法2024/06/14
1.8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血。2.在75%的酒精中,浸泡5min。3.無菌狀態下取脾臟。4.取一干凈10cm大皿,放入無菌的70um濾網,將脾臟置于濾網上,加入2ml培養基。5.用研磨棒輕輕研磨臟器,將脾臟組織研磨成單細胞狀態,直到只剩下臟器的結締組織為止。6.研磨時動作應輕柔,用力過大可導致細胞死亡。7.棄去濾網和濾網上的結締組織,收集平皿內的細胞懸液,400g4min離心沉淀。8.用PBS重懸沉淀,就可以進行后續實驗。
大鼠腹腔注射方法2024/05/11
1.大鼠腹腔注射的位置在兩后肢連線與腹中線交叉兩側1cm處。2.左手固定大鼠,使腹部向上,讓大鼠頭處于低位。3.注射位置消毒4.右手持連有5號針頭的注射器。5.將注射器沿45°角斜向穿過腹肌進入腹腔,此時有落空感,回抽無回血或尿液,即可注入藥液。6.緩慢抽出注射器,用棉球按壓注射部位,注射完畢。注意事項1.注射時,大鼠腹部朝上,頭處于低位,使臟器移向胸部橫隔處,以免被針頭刺入。2.為避免注射后藥液從針孔流出,注射針頭不要太粗。
小鼠腹腔注射方法2024/05/11
1.小鼠腹腔注射的位置在兩后肢連線與腹中線交叉兩側0.5cm處。2.首先采用背側保定法抓取小鼠,使其頭部稍向后仰,腹部向上,小鼠左后肢用小指固定住。3.再用75%酒精棉球消毒注射部位。4.將注射器針頭與皮膚呈45度角刺入小鼠腹腔,回抽針栓,如無回血或液體即可注入藥物。5.注射后,緩慢拔出注射器,用棉球按壓注射部位,注射完畢。注意事項1.注射時,小鼠腹部朝上,頭處于低位,使臟器移向胸部橫隔處,以免被針頭刺入。2.為避免注射后藥液從針孔流出,注射針頭不要太粗。
大鼠尾靜脈注射方法2024/04/26
1.用固定裝置固定大鼠,將尾巴露出。2.使用酒精棉球擦拭消毒大鼠尾巴,擴張血管。3.用1ml注射器。4.用左手拇指和食指固定住尾巴,在尾巴的下1/4處進針,針頭與尾巴平行,進針時,針頭斜面朝上。5.回抽看血液是否回流,以確保針頭在血管內。6.注射完成后,用干棉球按壓注射部位1-2分鐘以止血。注意事項:1.固定大鼠也要固定尾巴。2.推注藥物時,如果有阻力或白色皮丘出現,則意味著針頭未刺入血管,此時應更換位置。3.多次注射,要從尾巴遠端開始注射。
小鼠尾靜脈注射方法2024/04/19
1.用專用固定裝置固定小鼠,前部有氣孔保障小鼠呼吸,后部將尾巴露出。2.小鼠尾靜脈左右兩條,使用酒精棉球擦拭消毒尾巴,擴張血管。3.用1ml注射器,4號針頭。4.用左手拇指和食指固定住靠近尾部末端約1/3處。5.右手持注射器,針尖斜面朝上,沿與靜脈平行方向進針。6.輕推針栓,如無阻力,即可注射藥物。7.拔出針頭前,先用干棉球按壓止血。注意事項:1.推注藥物時,如果有阻力或白色皮丘出現,則意味著針頭未刺入血管,此時應更換位置。2.多次注射,要從尾巴遠端開始注射,漸進向尾根方向移動。
來自結直腸癌的病人類器官原代培養2024/04/19
一、操作步驟1.組織4℃條件下從醫院取回。2.消毒取樣的15ml管,取出組織,放到10ml大皿中。3.用含4抗的PBS溶液浸泡,清洗組織。4.再用組織緩沖液浸泡、清洗三遍。5.將組織剪成1mm3大小的組織塊,轉移到15ml管中消化。6.在37℃水浴鍋中,消化15min。7.取少量液體在顯微鏡下觀察,看到較多的單細胞和較少的細胞簇后,終止消化。8.用100μm篩過濾,然后300g4℃離心5min,移去上清。9.重懸沉淀,轉移到2ml離心管中,300g4℃離心5min,移去上清。10.估算沉淀的細胞
小鼠灌胃操作2024/03/26
一、左手固定小鼠,確保其身體成一直線,頭部固定,避免活動。二、灌胃針從小鼠左側嘴角進入,壓住舌頭,抵住上顎,輕輕向內推進,進入食管后會有一個刺空感。三、在灌注藥液時需注意小鼠是否有強烈掙扎現象。四、一般灌胃針插入深度:小鼠2-3cm。五、一次灌胃量:0.1-0.2ml/10g。伊萊博生物科技(上海)有限公司,公司總部位于上海長江軟件園。2024年1月與上海大學醫學院成立聯合研究中心,主要以生命科學研究為基礎,專注于研究成果轉化及技術服務創新,建立了包含腫瘤生物學、病理學、免疫學、細胞生物學、生物
大鼠灌胃操作2024/03/26
一、用左手固定大鼠的頭部,使其頭部和頸部成一直線,方便灌胃針頭進入口腔。二、將灌胃針從大鼠的左側嘴角插入,壓住舌頭,抵住上顎,輕輕向內推進,進入食管后會有一個刺空感。三、在灌胃針插入過程中,應緊貼咽后壁進針,避免損傷食道。若灌胃針進入氣管,大鼠會劇烈掙扎。四、觀察大鼠的反應,如無過度掙扎,可嘗試推注藥物。如阻力過大或動物反應劇烈,可退針后插入。五、一般灌胃針插入深度:大鼠4-6cm。六、一次灌胃量:大鼠1-2ml/100g。伊萊博生物科技(上海)有限公司,公司總部位于上海長江軟件園。2024年1
成年小鼠關節軟骨細胞原代培養2024/03/19
1.C57小鼠,8-10周,通過頸椎脫位處死,浸入75%乙醇浸泡5分鐘,轉移到通風柜中的解剖盤中。2.使用眼科剪和鑷子,使髖關節脫臼,保持股骨頭完整。3.用止血鉗去除每個股骨頭的軟骨帽,將組織放入含2%雙抗的PBS中。4.用冰冷的含2%雙抗的PBS清洗2-3遍,將關節軟骨小心移到2ml離心管中。5.用眼科剪刀將軟骨帽剪成約1mm3的碎片,加入3ml預熱的CollagenaseD(1.5mg/ml)。6.放入37℃、80rpm的搖床中進行第一次消化,時間2h。7.第一次消化結束后,加入含血清的培養
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