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鱟試驗法的出現和發展是怎么樣？2022/11/10

美國是發現、發明鱟試劑和最先建立鱟試驗方法的國家，早在1956年，美國動物學家于F·Bang發表了一篇《鱟的一種細菌性疾病》的論文，詳細地闡述了細菌毒素使蘊血凝固的現象，隨后F·Bang和J·Levin合作開始了對鱟凝血研究，并在1964年提出了鱟血凝集的初步機理，到了1968年兩人終于建立了鱟試驗方法。其后隨著人們對鱟試劑的開發研究以及對鱟試驗方法的不斷認識，其技術越來越成熟，在1973年，美國食品藥物管理局（FDA）承認鱟試劑是一種生物制品。1980年，美國藥典第2版（uspxx）首先收載了

內毒素是怎么產生的？2022/11/10

自從內毒素被發現百年來，人們一直認為內毒素作為細菌細胞壁的結構成分只有在菌體死亡或人工裂解時才釋放出來，但近年來發現革蘭氏陰性菌在細菌對數生長期或細菌營養缺乏時也釋放內毒素。應用電子顯微鏡技術發現，在細菌對數生長期，革蘭氏陰性菌外膜過度合成，過剩的外膜在菌體表面形成許多“皰疹樣結構”(strutureafblebs)，內毒素以“出皰疹”的方式被釋放到周圍介質中去.菌體外膜上的“皰疹”有大小兩種類型，“大皰疹”在菌體分裂產生橫隔的過程中形成，隨菌體分裂成兩個細菌而死亡；“小皰疹”存在于菌體的外表面

內毒素檢測的方法有哪些？2022/11/09

內毒素的檢測有傳統的家兔熱原試驗（rabbitpyrogentest，RT）、鱟試驗法（limulustest，LT）以及其他的一些特殊方法。（一）家兔熱原試驗法此方法即將一定量的被檢標本靜脈注人家兔體內，觀察其注射后的發熱情況，以決定所檢標本中有無熱原存在。RT法為一種定性檢測內毒素的方法，應用歷史較久，此方法本身有許多限制，如家兔對內毒素在反應上有個體差異﹑敏感度不高、不能定量測出內毒素等。（二）鱟試驗法細菌內毒素檢查法也稱之謂鱟試驗法（LT法）英文為BacterialEndotoxinsT

應有鱟試驗法檢測食品中的細菌內毒素含量2022/11/09

食品安全關系到每一個人的身體健康。如今，人們越來越重視食品的安全質量，食品若是受到細菌污染，就會隨著細菌代謝的過程中產生細菌內毒素，即使在高溫高壓下，細菌內毒素也不易被破壞。若是人體大量食用則會產生急性中毒的癥狀，少量長時間食用就會引起慢性中毒，對人體極其有害。所以對正式投入市場的食品都需要進行細菌內毒素檢測。肉類、蛋、蛋制品、牛奶、飲料等的細菌內毒素主要都是由革蘭氏陰性菌引起的。1、肉制品的細菌內毒素檢測在肉類中的革蘭氏陰性菌，大部分都是假單胞菌。若是食物存放的環境潮濕且氣溫又高，變形桿菌就很

內毒素工作標準品特點及保存條件2022/11/09

內毒素工作標準品也可稱為內毒素國家標準品，它是大腸桿菌O113:H10的純化提取物，與美國藥典和歐洲藥典參考標準內毒素(RSE)使用的菌株相同。廣泛用于各類細菌內毒素檢測實驗。用作RSE的經濟替代方案，可運用在所有鱟試劑檢測內毒素的試驗中。此外還用于鱟試劑靈敏度復核、干擾實驗及設置陽性對照及供試品陽性對照的各種陽性對照等實驗。復蘇后的內毒素工作標準品存儲于2-8℃，不能冷凍。內毒素工作標準品產品優勢：1、CSE對去熱原研究特別有用。2、每個CSE裂解物批次配對的分析證書提供特定于批次組合的效力。

內毒素對血液循環系統的影響及機理2022/11/08

內毒素可引起白細胞和血小板減少，激活凝血、纖溶系統，產生出血傾向，可導致彌漫性血管內凝血（DIC）的發生。其機理在于內毒素（脂多糖）可激活Hageman（Ⅻ）因子，內毒素的活性成分類脂A與Ⅻ因子結合后，在白細胞參與下促使凝血酶的生成、使纖維蛋白原轉變為纖維蛋白，從而導致彌漫性血管內凝血的發生。DIC的發生是通過Ⅻ因子啟動內、外凝血系統引發的全身性癥狀。DIC嚴重時，可導致嚴重的休克癥狀。1、內毒素（脂多糖）對中性粒細胞的作用及機理：內毒素（脂多糖）能引起人體血液中中性粒細胞的增多，這是人體對內毒

內毒素對糖代謝的影響及其機理2022/11/08

內毒素直接或間接損害肝臟，引起糖代謝紊亂及酶學、蛋白代謝的改變。動物實驗證明：內毒素（脂多糖）注入體內后初期可引起血糖的暫時升高，數小時后，可導致血糖的持續降低，表現為明顯的低血糖癥。（1）致病機理：脂多糖能刺激腎上腺素的分泌和釋放，使磷酸環化酶活性增強，加速糖分解，使血糖濃度表現為暫時性升高。（2）低血糖癥的主要機理：脂多糖進入機體數小時后，始作用于肝細胞，引起肝細胞的損傷，使糖原異生的關鍵酶（如葡萄糖-6-6磷酸酶；丙酮酸羧基酶peck；糖原合成酶）活性降低，抑制糖原的異生和分解，激活丙酮酸

內毒素的致病機理簡介2022/11/04

內毒素的致病機理下圖簡圖表示。1、致熱性極微量(1~5ng/kg)的內毒素注射入人體足以引起健康成人2小時內產生發熱反應，且維持4小時左右，而對于革蘭氏陰性菌感染，慢性消耗性疾病及晚期腫瘤病人，引起發熱反應的最-低內毒素劑量可低至0.2~0.5ng。內毒素可使人體和動物致熱，人體對內毒素致熱原敏感。0.0001~0.005μg/kg傷寒沙門氏菌內毒素即可引起人體發熱，而家兔發熱量比人高10倍左右。也就是說，在正常情況下，人體內內毒素的正常閾值保持在0.001~0.05ng/ml之間，一旦人體免疫

內毒素的生物學活性是怎么樣的？2022/11/04

細菌內毒素即脂多糖（LPS）是由脂質和多糖組成的大分子物質，其活性中心為類脂A。多種生物學系統的實驗證實：類脂A可介導內毒素幾乎所有的生物學活性，LPS及其類脂A對機體可發揮廣泛的生物學作用，如致機體發熱、休克、彌漫性血管內凝血、B淋巴細胞分裂、內臟器官實質性損傷等，嚴重者可危急生命，常見的疾病如發熱、感染性疾病，腸道疾病、肝衰、胰腺炎等都與內毒素在體內的存在密切相關，且其引起的死亡率甚高，美國每年因內毒素致死的病人達10萬人之多。一、內毒素生物學活性1、非特異地與細胞膜結合，干擾細胞膜正常功能

使用鱟試驗法檢測水質內毒素含量的優點2022/11/04

水質衛生安全的細菌學指標的主要標準一般以大腸菌數指數和大腸菌數值為主。雖然這些方法使用的原料簡單，操作起來也方便，但每一個標本都需進行檢查，而檢查結果也需要24至48小時以內才會出結果，而使用鱟試驗法檢測水質衛生，在取樣后2小時內便能得到結果，速度非常快。據國外報道，水里面的總內毒素的濃度(特別是結合內毒素濃度)與細菌菌落數呈正比關系。如果以細菌菌落對總內毒素或結合內毒素的對數換算值繪制出回歸曲線，可以顯示兩者之間的高度相關性。因此，可以通過檢測水中內毒素的量來了解水中的細菌污染程度。鱟試驗法可

內毒素和淋巴細胞中的細胞膜非特異結合的介紹2022/11/03

內毒素是小鼠B淋巴細胞的致有絲分裂原，它能誘導B細胞增殖，并且分化成分泌抗體的漿細胞。T細胞的少數亞群也可以對內毒素起反應。這些作用的引發都是通過內毒素和淋巴細胞（特別是B細胞）上存在有內毒素受體，但是它也可以非特異地和內毒素結合。已經知道，類脂A對淋巴細胞膜有一定的親和性，堿水解的內毒素能增強這種親和作用，而磷脂酰乙醇胺則能夠抑制這種親和作用。在大部分情況下，這種親和作用表現為被動的內毒素非特異結合作用。內毒素和淋巴細胞膜也存在著主動的非特異結合，表現在內毒素可以顯著降低細胞膜的膜電壓，產生了

內毒素和紅細胞及血小板細胞膜的非特異結合2022/11/03

1、紅細胞早在50年代，人們就發現如果將內毒素加入綿羊紅細胞中能使紅細胞被動致敏，產生凝集，并在外源性同種內毒素抗體存在下產生補體介導的細胞溶解反應，在紅細胞膜肯定存在一種能識別內毒素并能與之結合的活性物質，現在我們知道紅細胞對內毒素識別作用不僅可以通過特異性識別（內毒素受體)，而且可以通過非特異的結合來完成。內毒素和紅細胞的非特異性結合不僅可以通過被動的疏水作用，而且可以通過主動結合的方式完成。總之，內毒素和紅細胞之間存在著非特異性的和特異性的結合，其中非特異性的結合可以通過主動的和被動的兩種

內毒素和細胞膜磷脂成分的非特異結合2022/11/03

革蘭氏陰性菌的內毒素能夠引起許多細胞的生理或病理反應，這些細胞包括肝細胞、脂肪細胞、淋巴細胞、巨噬細胞、多形核白細胞、血小板以及內皮細胞等。這些細胞產生的反應都是通過內毒素和細胞膜結合而介導的，內毒素和細胞膜的結合可以分為特異性（通過受體）和非特異性（通過細胞膜脂類成分）兩種，后一種結合往往以不飽和性和無配體特異性為特征的。內毒素和細胞膜的非特異性結合可以通過許多細胞膜的活性成分來實現的，這些活性成分包括糖蛋白、糖磷脂和磷脂。事實上，這幾種活性成分都已證實能和內毒素非特異結合，但是，通過對內毒素

菌苗、疫苗、血液制品及干擾素，如何檢測細菌內毒素？2022/11/02

生物制劑的制備過程中也需要檢測細菌內毒素。生物制劑的種類很多，其中包括菌苗、疫苗、血液制品及干擾素（IFN）等那它們如何檢測細菌內毒素呢？一、菌苗菌苗在制備時，多多少少都會受到內毒素的污染，尤其是革蘭氏陰性菌菌苗，受內毒素污染的程度會更高。為了能更好地檢測菌苗中的細菌內毒素，可以采用靈敏度高、檢測速度快且準確并可定量的鱟試驗法。有試驗檢測發現，用鱟試驗法檢測多糖體菌苗的細菌內毒素含量時，內毒素含量程度高的菌苗（14000ng內毒素/100μg）其發熱反應率也是最高的，1.8～1.9%的肛溫都超過

脂多糖結合蛋白介導細胞激活的信號傳遞是怎么樣的？2022/11/02

脂多糖（LPS）作用的靶細胞主要是單核/巨噬細胞。LPS在誘導單核/巨噬細胞合成的分泌細胞因子的過程中脂多糖結合蛋白（LBP）起著信息轉導的作用。血漿中的LBP與LPS的類脂A部分連接形成高親和性復合物，這一復合物再經膜蛋白CD14受體連接于巨噬細胞表面，使巨噬細胞快速激活，并誘發腫瘤壞死因子（TNF）的產生及白細胞介素-1β（IL-1β）mRNA的轉錄。單核/巨噬細胞在接受TNF、LPS、IL-1刺激后釋放IL-6，LPS與TNF、IL-1、干擾素r（IFNr）之間具有協同作用。IL-6一方面

細胞識別內毒素機制以及CD14和其他一些脂多糖的識別分子的介紹2022/11/02

一、細胞識別內毒素機制脂多糖（LPS）與脂多糖結合蛋白（LBP）形成復合物后，能有效地與可溶性CD14（sCD14）或膜結合CD14（mCD14）受體結合，并活化細胞反應。LPS在細胞膜上的識別在LPS的攝取和誘發穿膜信號乃至細胞的活化是必須的。雖然有幾種蛋白質與此有關，但其中CD14提呈LPS至具有功能性的LPS受體上。sCD14途徑控制內皮細胞和上皮細胞對LPS的反應。最近研究表明，通過依賴LBP/CD14途徑的LPS誘導細胞活化過程中，細胞中蛋白酪氨酸磷酸化起重要作用。二、CD14和其他一

內毒素細胞內受體及其介導的信號傳遞2022/11/01

受體是細胞表面或胞內亞細胞組分中的一種蛋白分子，它可以識別并特異地與有生物活性的化學信號分子（配體）結合，從而激活或啟動一系列生物化學反應，使該化學信號分子發揮其特定的生物效應。水溶性信號分子通過細胞表面受體起作用，而脂溶性信號分子則主要通過細胞內受體行使其效應。目前，已知至少有三類細胞表面的受體：通道關聯受體（channel-linkedreceptor）、催化受體（catalyticreceptor）和G-蛋白關聯受體（G-protein-linkedreceptor）。這是按其轉導信號的不

內毒素細胞間的信號傳遞是怎么樣的？2022/11/01

生命活動的信息是通過信號來傳遞的。多細胞體中，細胞通訊（cellcommunication）包括細胞與細胞之間的通訊（即胞間信號傳遞）和細胞內的通訊（即細胞內信使傳遞）。細胞間信號傳遞細胞間的信號傳遞有三種形式:（1）通過分泌化學物質作為信號如激素，傳遞給一定距離外的其他細胞；（2）信號分子以膜結合的方式，通過直接的物理接觸，影響其他細胞，如細胞識別與粘合現象；（3）細胞間形成間隙連接，小分子物質可通過間隙連接直接進入另一個細胞的胞漿內并發生作用，從通訊的聯絡方式看，第一種形式屬于間接聯絡類型，

細菌內毒素中類脂A及脂多糖的立體構型介紹2022/11/01

在《細菌內毒素中脂多糖之類脂A化學結構的簡介》一文中有提到：類脂A（又稱脂質A），它是脂多糖的毒性及生物學活性中心。為一種糖磷脂，現認為細菌外膜的外層可能是類脂A。接下來介紹：類脂A及脂多糖的立體構型。一、離體脂多糖的雙層結構應用X-衍射技術已經證明脂多糖無論處于干燥狀態還是在水溶液中，均能形成雙層結構。根據脂多糖的來源不同，它們可形成不同厚度的雙層結構。例如奇異變形桿菌脂多糖可形成9.6nm厚度的雙層結構，大腸桿菌B/r脂多糖可形成10nm厚度的雙層結構（根據脂多糖中的含水量不同其厚度可有改變

細菌內毒素化學結構之O-特異多糖鏈和核心寡聚糖的介紹2022/10/31

內毒素的主要化學成分為脂多糖(LPS)，脂多糖由結構及生物學活性互不相同的三部分組成，即O-特異多糖鏈(O-specificpelysaccharidechain)、核心多糖(Coreoligosaccharide)、類脂A(lpidA)。有的學者將脂多糖的化學結構分為兩大部分，即多糖(polysaccharide)和類脂A(LipidA)，多糖部分又可進一步分為O-特異性多糖鏈及核心寡聚糖(圖6)。今天將介紹內毒素中脂多糖的O-特異多糖鏈(O-specificpelysaccharidecha