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科德角國際生物醫學科技(北京)有限公司
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內毒素檢測時,血液前處理方法的注意點有哪些?2022/12/07
1、在進行血中內毒素測定時,要注意選擇方法和試劑。2、血漿或血清制備作為臨床上常用樣本主要為血漿,其使用率占95%以上,因此作為體液主要部分血漿的制備就顯得十分重要。據Das報道:內毒素一般除了游離狀態外,還大量附著在血小板上,因此用含有大量血小板的血漿作為樣品更為合適。在制備人血漿或動物血漿時,目前國外為了防止細胞的破壞多采用低溫分離,使用含有大量血小板的血漿樣品,即在4℃1000gx10分鐘分離條件,或在無低溫離心機時用3000gx40秒分離條件。切不可在常溫下進行高速、長時間分離,另外,在
幾種血液中內毒素的前處理測定方法2022/12/05
(1)氯仿提取法:測定方法如下:(2)稀釋加熱法:即水稀釋加熱法作為簡便的前處理方法被普遍采用,由于稀釋倍數,加熱溫度和時間不同,結果也不全相同,其中主要方法見表6。在這些方法中由于不確定因素太多,因此值得探索的地方很多。為了克服稀釋加熱法的缺陷,避免濁度生成,人們開發出了使用表面活性劑(0.04%TritonX-100)稀釋,80℃5分鐘加熱處理方法。這個前處理方法,能得到很好的血漿內毒素回收率。減少非特異性濁度所引起的假陽性反應。尤其是日本和光純藥的ToxinonuterET201采用比濁時
除去血中干擾物質的前處理方法2022/12/05
一般來說由于血液的組成比較復雜,其中的許多物質尤其是高等動物的血漿或血清對TAL(LAL)試劑與內毒素反應很強的干擾作用。因此當我們對這類樣品的內毒素進行測定時,必須將其中的干擾物質除去后,方可進行檢測。目前作為血漿中的干擾物質主要有:各種蛋白酶抑制劑、內毒素結合蛋白以及纖溶酶原抑制劑等物質,對于比色法由于Xa因子能分解Boc-LEU-Gly-Arg-PNA肽鏈。因此在測定前排除這些干擾物是十分必要的。除去血中干擾物質的前處理方法主要有以下幾種,現分別介紹如下:(1)稀釋加熱法:血漿用溶解水進行
內毒素與慢性阻塞性肺疾病2022/12/05
慢性阻塞性肺疾病(COPD)在我國是常見病、多發病,發病率高達6%,嚴重地危害人民健康,特別對老年人的危害更大,嚴重地影響著老年人的生活質量。盡管慢性阻塞性肺疾病的病因及發病機制尚未明了,但感染在發病中的作用是不可忽視的。尤其在慢性阻塞性肺疾病的急性發作期,感染是主要致病因素,多為病毒和細菌感染。病毒感染后,機體免疫能力下降,可繼發細菌感染。在細菌感染中,院外感染主要是革蘭氏陽性菌;院內感染多為革蘭氏陰性菌,但老年患者,則均多見于革蘭氏陰性桿菌感染。張慧利等對22例慢性支氣管炎患者進行了血漿內毒
內毒素血癥與上呼吸道感染的關系2022/12/01
急性上呼吸道感染是指鼻腔、咽或喉部急性炎癥的概稱,是上呼吸道最常見的一種傳染病。患者不分年齡、性別、職業和地區,不僅具有較強的傳染性,而且可引起嚴重并發癥,應積極防治。根據病因不同,臨床表現可有不同的類型,如普通感冒、病毒性咽炎、喉炎和支氣管炎,皰疹性的咽喉炎,咽結膜熱﹑細菌性咽扁桃體炎。主要臨床表現為發熱、流涕、咽部充血、咳嗽﹑扁桃體腫大,充血、表面有黃色點狀滲出物,頜下淋巴結腫大等。急性上呼吸道感染主要由病毒感染引起,少數由細菌引起。其主要的病理過程為上呼吸道局部的改變,但近年來研究表明,上
內毒素引發肺炎病理現象2022/12/01
肺炎(pneumonia)是肺實質的炎癥,可由多種病原體引起,如細菌、病毒、真菌、寄生蟲等,其他如放射線、化學,過敏因素等亦能引起肺炎。肺炎是常見病,我國每年約有250萬例肺炎發生,12.5萬人因肺炎死亡,在各種致死病因中居第5位,老年或機體免疫力低下者(用免疫抑制劑、腫瘤、糖尿病、嗜酒、艾滋病或久病體衰者)伴發肺炎時,病死率尤高。肺炎按照病因分類可分為細菌性肺炎,病毒性肺炎、支原體肺炎、真菌性肺炎及其他病原體(立克次體、衣原體等)所致肺炎。在上述眾多病因中,細菌性肺炎最為常見,約占肺炎的80%
血液中的內毒素含量測定與干擾物質的去除2022/12/01
1、體液的組成體液包括血液(血漿、血清)、腹水、髓液、尿以及乳汁等,其中在臨床上一般以血液的使用率最為普遍。我們知道血液在心血管系統內是由有形物質(紅細胞、白細胞、血小板)及液體狀血漿組成。其基本組成如下圖:2、體液測定評價通過對體液中的內毒素含量測定,可以對革蘭氏陰性菌所引起的敗血癥、菌血癥、術前術后感染癥以及真菌感染癥等進行診斷,據國外文獻報道正常人血漿中的內毒素水平在3pg/ml左右。通過對血液中的內毒素含量測定可對以下一些癥狀進行監控和了解。(1)早期診斷;(2)給治療方案提供理論資料;
內毒素與多器官功能衰竭中腎衰及中胃腸道損傷的關系2022/11/30
一、內毒素與多器官功能衰竭中腎衰內毒素對腎臟的作用還不太明確。早在60年代初,Hinshaw就提出內毒素的早期靶器官是腎臟。其后Cavanagh證實了這一論點。動物注射內毒素后3分鐘腎血管阻力增加約6倍,與此同時并無心輸出量及血壓的下降。因此認為內毒素早期可影響腎臟。腎血流減少系毛細血管收縮所致,可能為功能性腎衰發生的基礎。Kikeri等給鼠注射內毒素3.5小時后,尿及尿鈉排泄量顯著增多,而腎小球濾過率減少50%,超微結構顯示吞噬細胞分離,腎小管周圍毛細血管內皮細胞水腫,但腎小球無明顯異常。證實
內毒素與多器官功能衰竭中心肌及中肺損傷的關系2022/11/30
一、內毒素與多器官功能衰竭中心肌損害關系內毒素對心臟有無作用是一個爭論已久的問題,70年代以前認為內毒素對心臟無影響,70年代后期大量研究表明對心臟有作用。Hinshaw等通過犬離體心實驗證實,心衰的發生機理不在于心臟抑制因子,而在于內毒素對心肌的損害。許多研究表明,內毒素可損害心肌線粒體、肌漿網、肌膜以及收縮蛋白等,使細胞膜系統受損,三磷酸腺苷產生及利用異常而發生心衰。過去對內毒素休克心衰的研究未予重視,認為心臟是休克最后衰竭的器官,臨床救治價值不大。現在人們的認識有所改變,心衰在膿毒癥或敗血
國內人血漿內毒素檢測的實驗操作方法2022/11/30
一、樣品的前處理1、取0.5ml人血漿(S),按如下方法稀釋:0.5mlS+0.5mID+1.5mlW→2.5mlS5式中:D為專用的稀釋劑;W為專用的細菌內毒素檢測(BET)用水;S5為稀釋了5倍的血漿,下標數字表示稀釋倍數。2、把裝有S5的小瓶置70℃的水浴中10分鐘。3、把經加熱處理的裝有S5的小瓶用3000rpm離心10分鐘,然后吸取上清液(仍記為S5)作BET。4、如果不立即作BET,可把經離心的裝有S5的小瓶置2~3℃冰箱保存,可在3天內作BET。二、稀釋標準內毒素1、取效價為10E
內毒素與多器官功能衰竭2022/11/29
多器官功能衰竭常繼發于嚴重感染,因此有人稱為膿毒綜合征,Meakins等主張胃腸是其始動部位,通過細菌和內毒素起作用。Frg等指出感染過程中內毒素是強有力的補體激活觸發物,它所激活的補體啟動了“瀑布效應”(cascade),釋放氧自由基、前列腺素類、內啡肽等介質,產生細胞毒性效應、微循環障礙、代謝紊亂,最終導致多器官功能衰竭的發生。大量研究表明,內毒素血癥不僅發生于創傷休克的初期,而且自始至終可能起著重要作用,貫穿于多器官功能衰竭的整個病程。因此有學者認為,感染的致命作用可能在于內毒素侵入體內導
血液中細菌內毒素常用測定方法2022/11/29
1968年自Levin和Bang發現并建立鱟試驗方法以來,就逐漸得到臨床及藥檢部門的重視和研究。尤其是在臨床檢驗方面的應用更是飛速發展。在鱟試驗法建立的初期,Levin就使用該法用于測定病人血漿中的內毒素,之后其應用范圍也越來越廣。隨著科學技術的不斷進步發展,鱟試驗方法的研究也逐漸完善,從最初的定性凝膠法逐漸向靈敏度更高的微量定量方面發展,因此使血液中內毒素測定變得更加快速、準確,更加適用于臨床各種內毒素感染癥狀的診斷。目前,在日本國內,以合成基質法為中心的血漿中的內毒素含量測定研究進行得比較深
內毒素與彌漫性血管內凝血2022/11/25
彌散性血管內凝血(disseminatedordiffuseintravascularcoagulation,DIC)為臨床常見的、嚴重危及病人生命的病理過程,它不是一個獨立的疾病,多并發于感染性疾病,表現為貧血和多部位的栓塞、出血,鑒于其情況復雜,發病機制中許多問題尚不清楚,因此防治比較困難。彌漫性血管內凝血常是多器官功能衰竭發生的重要誘因,尤其是重癥膿毒癥并發彌漫性血管內凝血極易發展為多器官功能衰竭,預后甚差。內毒素能促發彌漫性血管內凝血早已為人們所認識,其機理是多方面的,也是甚為復雜的,與
內毒素引起敗血癥休克的原因2022/11/25
目前,敗血癥休克病人的死亡率非常高,如在血液或腫瘤病房死亡率特別高,據某些報道難治性白血病病人可達90%,而在插導管相關的菌血癥導致的敗血癥休克病人中,由于感染因素的去除及抗生素的應用,死亡率僅15%。美國每年有10~15萬患者死于敗血性休克,在過去50年中,敗血癥的死亡率沒有變化,但事實上敗血性休克的發病率在過去50年中不斷增長。其主要原因可能是內毒素引起的毒性問題。敗血癥患者內毒素的來源有二,一是抗生素誘導內毒素釋放,二是源于腸源性內毒素血癥。如果內毒素一旦起到了“扳機”作用,炎癥的瀑布效應
鱟資源保護措施與策略2022/11/25
雖然我國目前沒有鱟資源的調查資料,但鑒于鱟是一種經濟價值和科研價值較高的海洋珍-稀動物,世界上屈-指-可-數的“活化石”,東方鱟現已被列人國家、自治區(1993年)重點保護水生、野生動物名錄中。許多專家及鱟試劑生產廠家強烈呼吁:建立鱟自然保護區,他們聯名上書請求福建省有關部門制訂法規、保護鱟資源,嚴禁捕殺食用鱟。廈門大學生物系教授,著名的鱟研究專家洪水根在1999年3月2日《廈門晚報》以“建立鱟自然保護區刻不容緩”為題,描述了鱟資源現狀,并建議:1.開展鱟資源重要性宣傳,提高市民鱟資源和環境保護
內毒素血癥——免疫低下兒童發燒的一個重要原因2022/11/24
免疫低下兒童出現原因不明的發燒是很普遍的事情,在診斷和治療上一直存在著許多問題,能作出正常診斷的只占病例的40%~60%,因此,臨床醫生往往不得不根據經驗應用抗生素治療,但有時療效不甚理想。AadHass等人對36例免疫低下發燒的兒童進行了研究。在發燒期間,利用鱟試驗法多次檢測了病人血中內毒素的濃度,其中11名病人(35.5%)的血中內毒素含量0.1Eu/ml(內毒素血癥的診斷標準),其中一名檢測值位于0.23Eu/ml到0.64Eu/ml之間。其中5名內毒素血癥患者,發燒期間血培養陰性,也沒有
內毒素與全身炎性反應綜合征2022/11/24
全身炎性反應綜合征(systemicinflammatoryresorsesyndrome,SIRS)是膿毒癥新定義中的Ⅰ期表現。1992年美國胸科學會和危重病急救醫學會聯合倡議,將沿用多年但含義模糊的名詞——膿毒癥(sepsis)予以重新定義,并將其分為序貫發生的4期:Ⅰ期全身炎性反應綜合征:具有下列2種以上表現:體溫38℃或℃;心率90次/分;呼吸20次/分,或PaCO2;白細胞計數12x109/L或或10%為幼稚型(桿狀核);Ⅱ期膿毒癥:全身炎性反應綜合征加細菌培養陽性;Ⅲ期嚴重膿毒癥:膿
鱟成瀕臨物種,保護迫在眉睫2022/11/24
目前世界上現存的鱟只有二亞科三屬四種,主要分布在北美的美國(美洲鱟)和東南亞的中國和日本(東方鱟)。我國是世界上少數擁有鱟資源的國家之一。在中國東方鱟主要分布在廣東、廣西、福建沿海海域,其主要來源有湛江、北海、長樂、平潭等地。廈門是我國具有鱟資源并具有綜合開發利用能力的主要城市,在市政府和市科委的支持下,廈門市的鱟開發研究已經取得良好效果。近年來,由于鱟醫用藥劑生產以及人們食用的需求,每年捕殺鱟的數量都在數萬頭以上。這一方面致使鱟數量銳減,另一方面也從根本上切斷鱟自然繁殖的最根本環節,使得鱟每年
內毒素血癥—發燒病人敗血癥的早期預測2022/11/23
革蘭氏陰性菌敗血癥是住院病人死亡的重要原因。確切診斷要依據血培養結果,需花費幾天的時間,許多實驗表明,無論是人和動物,革蘭氏陰性菌敗血癥的許多癥狀是由內毒素血癥造成的。內毒素可以激活單核巨噬細胞系統,通過白細胞介素-1、白細胞介素-6、白細胞介素-8腫瘤壞死因子等產生一系列毒性反應。即內毒素是革蘭氏陰性菌敗血癥的主要致病因素,用鱟試驗法測定病人血中內毒素,可以預測發燒病人敗血癥發生率。Sander等人對473例發燒病人血中內毒素進行了研究,其中發生敗血癥病人在3天追蹤觀察期間有6人(32%)死亡
燒傷后內毒素血癥的意義2022/11/23
燒傷可由熱水、蒸汽、火焰、電流、激光、放射線、酸、堿﹑磷等各種因子引起,燒傷除了高溫直接造成局部組織細胞損傷外,整個機體會產生一系列的改變。處于應激狀態可能釋放出:①應激性激素,由于疼痛刺激,血容量降低等,兒茶酚胺、皮質激素,抗利尿激素,血管加壓素,醛固酮等釋放增加;②炎癥介質,由于傷處組織受損或加以沾染細菌,緩激肽,補體碎片(C3a、C5a)等,組胺﹑色胺釋放;③花生四烯酸由于磷脂酶等作用,變為前列腺素、血栓質、白三烯;④各種其他因子,如血小板激活因子、白細胞介素,腫瘤壞死因子等。以上各種生物
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