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2017
12-22

實驗室新手指南之DNA&RNA提取
DNA提取取材料，加液氮研磨成粉末狀，迅速移入1.5mlEppendorf管中;加入800μl的CTAB提取緩沖液，混勻(CTAB在65℃水浴預熱)，每5min輕輕震蕩幾次，20min后12000r/min，離心15min;小心吸取上清液，加入等體積的酚：氯fang(各400μl)溶液，混勻，4℃，12000r/min，離心10min;小心吸取上清液，加入等體積的氯fang，混勻，4℃，12000r/min，離心10min；重復步驟(4)1-2次，以蛋白層不出現為止;取上清，-20℃沉淀1h，4
2017
12-22

實驗室新手指南之植物組織培養
MS培養液的配置MS大量元素母液的配制一般將大量元素配制成10倍的母液，使用時再稀釋10倍。按照配方表中用量依次分別稱取擴大10倍的：NH4NO3、KNO3,KH2PO4、MgSO4.7H2O、CaCl2.2H2O的量，所有藥品稱取完畢后用蒸餾水逐個溶解，待全部溶解后，zui后定容至1000ml，轉入1000ml細口試劑瓶中，貼上標簽，注明母液名稱、放大倍數、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存備用。MS微量元素母液的配制一般將微量元素配制成100倍的母液，使用時再稀釋100倍。按照配方表中
2017
12-22

實驗室新手指南之細胞培養
細胞原代培養胰酶消化法1、器材：將孕鼠或新生小鼠拉頸椎致死，置75%酒精泡2—3秒鐘(時間不能過長、以免酒精從口和肛門浸入體內)再用碘酒消毒腹部，取胎鼠帶入超凈臺內(或將新生小鼠在超凈臺內)解剖取肝臟，置平皿中。2、用Hank’s液洗滌三次，并剔除脂肪，結締組織，血液等雜物。3、用手術剪將肝臟剪成小塊(1mm2)，再用Hank’s液洗三次，轉移至小青霉素瓶中。4、視組織塊量加入5—6倍的0.25%胰酶液，37℃中消化20—40分鐘，每隔5分鐘振蕩一次，或用吸管吹打一次，使細胞分離。5、加入3—5
2017
12-21

實驗室新手指南之比色皿
比色皿的使用方法在使用比色皿時,兩個透光面要*平行,并垂直置于比色皿架中,以保證在測量時,入射光垂直于透光面,避免光的反射損失,保證光程固定。使用比色皿應注意以下幾點拿取比色皿時，只能用手指接觸兩側的毛玻璃,避免接觸光學面。不得將光學面與硬物或臟物接觸。盛裝溶液時,高度為比色皿的2/3處即可,光學面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然后再用鏡頭紙或絲綢擦拭。凡含有腐蝕玻璃的物質的溶液,不得長期盛放在比色皿中。比色皿在使用后,應立即用水沖洗干凈。必要時可用1∶1的鹽酸浸泡,然后用水沖洗干凈。不能將比色皿
2017
12-21

實驗室新手指南之分光光度計
分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光源，光源透過測試的樣品后，部分光源被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。操作方法接通電源，打開儀器開關，掀開樣品室暗箱蓋，預熱10分鐘。將靈敏度開關調至“1”檔(若零點調節器調不到“0”時，需選用較。根據所需波長轉動波長選擇鈕。將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內，使空白管對準光路。在暗箱蓋開啟狀態
2017
12-21

實驗室新手指南之移液器
移液器的使用調節量程：在調節量程時，如果要從大體積調為小體積，則按照正常的調節方法，逆時針旋轉旋鈕即可;但如果要從小體積調為大體積時，則可先順時針旋轉刻度旋鈕至超過量程的刻度，再回調至設定體積，這樣可以保證量取的zui高度。在該過程中，千萬不要將按鈕旋出量程，否則會卡住內部機械裝置而損壞了移液槍。裝配槍頭(吸液嘴)：在將槍頭套上移液槍時，正確的方法是將移液槍(器)垂直插入槍頭中，稍微用力左右微微轉動即可使其緊密結合。如果是多道(如8道或12道)移液槍，則可以將移液槍的*道對準*個槍頭，然后傾斜地
2017
12-21

實驗室新手指南之磁力加熱攪拌器
操作步驟將磁力攪拌棒放入盛有溶液的燒杯中。將燒杯放在加熱板上，插入傳感元件。打開電源，調節加熱速度，開啟攪拌。攪拌時，須慢慢調節調速鈕，調節過快會使攪拌轉子脫離磁鋼磁力，不停跳動。應迅速將旋鈕至停位，待攪拌子靜止后，緩緩升速攪拌，逐級穩定升速。室溫時粘度較大的液體，常常熱傳導性能也較差，加熱攪拌時，不宜迅速升溫，以免容器破裂。應充分利用恒溫裝置，逐步分級升溫，且須將傳感元件插入外加水套中。欲測容器內溫度可緩緩轉動調溫旋鈕使溫度指示紅標下降，當紅燈亮起，即時紅標指示溫度即為測元件插著液體之溫度。注
2017
12-20

實驗室新手指南之電泳儀
電泳儀使用方法首先用導線將電泳槽的兩個電極與電泳儀的直流輸出端聯接，注意極性不要接反。電泳儀電源開關調至關的位置，電壓旋鈕轉到zui小，根據工作需要選擇穩壓穩流方式及電壓電流范圍。接通電源，緩緩旋轉電壓調節鈕直到達到的所需電壓為止，設定電泳終止時間，此時電泳即開始進行。工作完畢后，應將各旋鈕、開關旋至零位或關閉狀態，并撥出電泳插頭。操作注意事項電泳儀通電進入工作狀態后，禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分，也不能到電泳槽內取放東西，如需要應先斷電，以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端，以
2017
12-20

實驗室新手指南之液氮罐
使用前檢查液氮罐在充填液氮之前，首先要檢查外殼有無凹陷，真空排氣口是否完好。若被碰壞，真空度則會降低，嚴重時進氣不能保溫，這樣罐上部會結霜，液氮損耗大，失去繼續使用的價值。其次，檢查罐的內部，若有異物，必須取出，以防內膽被腐蝕。液氮的充填填充液氮時要小心謹慎。對于新罐或處于干燥狀態的罐一定要緩慢填充并進行預冷，以防降溫太快損壞內膽，減少使用年限。充填液氮時不要將液氮倒在真空排氣口上，以免造成真空度下降。蓋塞是用絕熱材料制造的，既能防止液氮蒸發，也能起到固定提筒的作用，所以開關時要盡量減少磨損，以
2017
12-20

實驗室新手指南之PCR儀
操作步驟開機：打開開關，視窗上顯示“SELFTEST”，顯示10秒中后，顯示RUN-ENTER菜單：準備執行程序。放入樣本管，關緊蓋子。程序輸入與選擇如果要運行已經編好的程序，則直接按《Proceed》，用箭頭鍵選擇已儲存的程序，按《Proceed》，則屏幕顯示：按《Proceed》選擇ENABLE，則開始執行程序。輸入新的程序：在RUN-ENTER菜單上用箭頭鍵選擇ENTERPROGRAM，按《Proceed》選擇NEW，命名新的程序，zui多8個字母，輸入后按《Proceed》確認(如何輸入
2017
12-20

慢病毒感染目的細胞實驗步驟
1.感染預實驗以24孔培養板為例，同時進行目的細胞和工具細胞的感染預實驗。工具細胞可選擇293T（人胚腎上皮細胞）、H1299（人肺癌細胞）或其它細胞。實驗材料：培養基、24孔培養板，移液槍，槍頭，EP管，細胞計數板、冰盒、廢液缸等。（根據目的細胞情況，可酌情使用Polybrene）Day1：準備細胞：培養細胞至對數生長期，細胞以胰酶消化計數后，用細胞計數測出細胞密度，每孔接種5×104個細胞，添加細胞培養液至500µL。通常情況下，該接種量的H1299或293T細胞在感染后第3天可生長至80%
2017
12-19

細胞凍存和復蘇實驗
細胞凍存和復蘇：（1）用于生物學保種；（2）用于醫學上干細胞研究；（3）用于傳代培養。實驗方法原理細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以zui大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減少細胞內冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。實驗材料
2017
12-19

磁微粒化學發光免疫分析
免疫學的發展史起始于微生物學研究，于18世紀建立，19世紀至20世紀中期進入經典發展期。這一時期，人們對免疫功能的認識由人體現象的觀察進入了科學實驗時期。20世紀初期到中期，進入近代免疫學時期。從20世紀中期開始，真正進入現代免疫學時期。現代免疫學的檢測基本歷經了以下幾個過程，如圖1所示。圖1.免疫檢測技術的發展史免疫學檢測主要是利用抗原和抗體的特異性反應進行檢測，利用同位素、酶、化學發光物質等對檢測信號進行放大和顯示，常被用于檢測蛋白質、激素等微量物質。各類免疫學檢測方法的性質及發展狀況詳見表
2017
12-19

細胞分離技術
1.從原代組織中分離細胞將組織塊分離（散）成細胞懸液的方法有多種，zui常用的是機械解離細胞法、酶學解離細胞法以及螯合劑解離細胞法。從原代組織中獲得單細胞懸液的一般方法是酶解聚。細胞暴露在酶中的時間要盡可能的短，以保持zui大的活性。下列步驟可以解聚整個組織，獲得較高產量的有活性細胞。（1）胰蛋白酶(Trypsin)●在去除不需要的組織后，使用無菌的解剖刀和剪子把剩余的組織切成3~4mm小片，通過懸浮在無鈣鎂的平衡鹽溶液中清洗組織碎片。讓組織碎片沉淀，去除上清液。重復清洗2到3次?！駥⑹⒂薪M織碎
2017
12-15

什么是*、二、三方實驗室
第三方實驗室是社會實驗室，獨立于*方實驗室和第二方實驗室，為社會提供檢測或校準服務的實驗室，數據為社會所用。目的：提高和控制社會產品質量。一般使用國家標準或標準。第二方實驗室是指需方實驗室，組織內實驗室或委托某實驗室代表其檢測或校準供方提供的產品，數據為我所用。目的：提高和控制供方產品質量。一般使用約定標準。*方實驗室是指供方實驗室，組織內的實驗室，檢測或校準自己生產的產品，或委托某實驗室代表其檢測或校準自己生產的產品，數據為我所用。目的：提高和控制產品質量，一般使用企業標準?！纠纭?A公司生
2017
10-31

細胞培養的基本技術
一、清洗新采用和重新使用的培養器皿，都要嚴格清洗，以防各種有害物質對培養細胞損害。培養用的塑料器皿目前主要依靠進口，均已無菌密封包裝，可直接使用。對于塑料瓶蓋或膠塞等，可水中浸泡后用2％NaOH煮沸10～20min，自來水中浸泡和蒸餾水漂洗2～3次，晾干備用。細胞培養中的絕大部分器皿系玻璃制品，清洗過程為以下步驟。1.浸泡新使用或重復使用的玻璃器皿須經5％鹽酸溶液或自來水浸泡過夜或煮沸30min，水洗。以去除新購進玻璃器皿所帶有灰塵、鉛、砷等物質，并消除其弱堿性。2．刷洗浸泡后用軟毛刷和的洗潔精
2017
10-31

細胞培養的操作步驟
一、原代培養及其操作步驟原代分離細胞培養是指從供體內取出組織后，經機械以及消化分離成單個細胞或單一型細胞群，使之在體外模擬人體生理環境，在無菌、適當溫度和一定的營養條件下，生存、生長和繁殖。原代培養細胞常有不同的細胞成分，生長緩慢，但是更能代表所來源的組織細胞類型和表達組織的特異性特征。利用原代細胞培養做各種實驗，如藥物測試、細胞分化及病毒學方面的試驗效果很好。其操作步驟如下。1.剪切組織先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術鑷去除黏附的結締組織等非培養所
2017
09-25

儀器設備的三色標識
一般對于儀器設備的標志管理應是源于原JJG1021-90《產品質量檢驗機構計量認證技術考核規范》的規定。對所有儀器、設備實行標志管理，分別貼上國家技術監督局計量司認證辦公室統一制訂的標志。其應用范圍為：1合格證（綠色）計量檢定（包括自檢）合格者；設備不必檢定，經檢查其功能正常者（如計算機、打印機）；設備無法檢定，經對比或鑒定適用者；2準用證（黃色）多功能檢測設備，某些功能已喪失，但檢測工作所用功能正常，且經校準合格者；測試設備某一量程精度不合格，但檢驗工作所用量程合格者；降級使用者。3停用證（紅
2017
08-15

ASE在聚合物領域的應用
作為快速有效的萃取技術，ASE®被廣泛地用于聚合物中添加劑的提取。1.提取聚合材料中的鹵素阻燃劑多溴聯苯（PBB）和多溴聯苯醚（PBDE），早在20世紀70年代被開發，是為起阻燃作用在生產電子設備時添加到聚合物中的，隨著電子產品和日用品的廢棄進入我們的環境，已經有明確證據標明會危及內分泌和肝功能，歐盟發出禁止生產和限制使用的禁令RoHS指令《關于限制在電子和電器設備生產過程中添加使用某些的物質的規定》，該指令已于2006年7月1日在整個歐共體市場強制執行，ASE®可以從聚合物中快速萃取多種溴化阻
2017
08-14

ASE萃取土壤中的烴類污染物
萃取土壤中的BTEX汽油，Diesel柴油，TPH石油總烴世界各地都有大量的儲存烴類基質燃料的地下儲油罐。這些儲油罐很多存在泄漏，使周圍的土壤被泄漏的汽油、柴油、石油所污染。1992年全年美國僅對五百萬地下儲油罐中的兩百萬進行了泄漏檢測。顯然，檢測土壤中烴類污染物含量的能力是個重要的問題，采用ASE®可以大大加速樣品的前處理進程，其結果可以*取代傳統的索氏提取方法。推薦的ASE®條件樣品量：3-20g，含水量大于40%的樣品按照硅藻土與樣品1:1的比例混合溶劑：四氯乙烯（結果用IR測定）；正己烷

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