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上海申知心生物科技有限公司
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腦積水大鼠模型的建立2024/01/09
腦積水大鼠模型的建立腦積水大鼠模型的建立方法:1.雄性SD大鼠、8周齡,戊ba比妥鈉麻醉。2.大鼠頭頸部皮膚去毛后,固定在立體定位上,常規(guī)消毒。3.在頸部后面的皮膚上做一個中線切口,鈍性分離肌肉,暴露寰枕膜。4.微量注射器進入寰枕膜失去阻力后停針,注入0.02mL無菌高嶺土懸浮液。5.注射速度6ul/s,注射后停針10min。6.拔針后,用醫(yī)用耳腦膠封閉針眼,縫合切口,術(shù)后抗感染治療。7.術(shù)后每天給大鼠稱重并監(jiān)測其神經(jīng)功能缺陷。8.大鼠術(shù)后3周,經(jīng)MRI檢查確認模型成功后,取其腦組織,4%多聚甲
自體血液輸注建立小鼠腦出血模型2024/01/09
自體血液輸注建立小鼠腦出血模型自體血液輸注建立小鼠腦出血模型的模型建立:1.C57BL/6J雄性小鼠,25–30g。2.稱重、麻醉,確認麻醉深度。3.當小鼠失去意識時,在立體定位儀上固定小鼠頭部,用鑷子檢查小鼠頭部的固定情況。4.用兩個耳棒和鼻夾固定小鼠頭部,顱平面水平。5.切開頭皮,確認bregma點,記下坐標。6.在右側(cè)頭骨上標記點處鉆一個孔,bregma前0.2mm,深3.5mm,側(cè)2.2mm。7.切尾法取小鼠自體血30ul。8.用微量注射器連接抽吸肝素的細管,抽吸血液,以2ul/min的
高血脂癥動物模型可用于研究高血脂癥的發(fā)病機制和藥物治療2023/09/08
高血脂癥動物模型是一種重要的實驗工具,用于研究高血脂癥的發(fā)病機制和藥物治療。通過利用這些模型,我們可以更好地理解高血脂癥對心血管健康的影響,并為預防和治療高血脂癥提供新的思路和方法。然而,進一步的研究仍然需要結(jié)合臨床觀察和其他研究手段,以全面而準確地理解高血脂癥及其相關(guān)疾病。常用的高血脂癥動物模型包括小鼠、大鼠、兔子等。這些動物模型可以通過不同的方法誘導高血脂癥,如高脂飲食、基因突變或遺傳改良等。通過建立這些模型,研究人員可以模擬人類高血脂癥的特征,并觀察其對心血管系統(tǒng)的影響。利用高血脂癥動物模
胎鼠海馬神經(jīng)元的原代培養(yǎng)2023/02/28
一、背景海馬是大腦顳葉內(nèi)側(cè)的一個解剖結(jié)構(gòu),因為形狀類似海馬稱為海馬體。海馬體的主要組成基本單位是神經(jīng)元,海馬神經(jīng)元的生理功能與人的記憶密切相關(guān)。一些疾病會使海馬神經(jīng)元出現(xiàn)損傷,比如常見的阿爾茲海默病、單純皰疹病毒性腦炎、自身免疫性腦炎等等,如果這些疾病出現(xiàn),就會導致記憶障礙,甚至癡呆的表現(xiàn)。神經(jīng)細胞是近代神經(jīng)學科中研究重點之一,神經(jīng)細胞體外培養(yǎng)是指在體外模擬建立體內(nèi)生長條件,使神經(jīng)細胞或神經(jīng)膠質(zhì)細胞在其生存和生長并維持其形態(tài)和功能的方法。神經(jīng)細胞體外培養(yǎng)技術(shù)已成為當今神經(jīng)科學研究中的主要方法之一
胎鼠皮層神經(jīng)元的原代培養(yǎng)2023/02/28
一、背景大腦皮層是調(diào)節(jié)軀體運動的高級中樞。它由初級感覺區(qū)、初級運動區(qū)和聯(lián)合區(qū)三部分構(gòu)成。人類大腦皮層的神經(jīng)細胞約有140億個,面積約2200平方厘米,主要含有錐體形細胞、梭形細胞和星形細胞(顆粒細胞)及神經(jīng)纖維。體外原代培養(yǎng)神經(jīng)元作為神經(jīng)科學研究的有力手段,越來越受到廣大科研工作者的重視。由于神經(jīng)元是一種高度分化的細胞,動物出生后很少分裂,相對于其它細胞而言,神經(jīng)元在體外更難以存活和生長。因此,體外培養(yǎng)神經(jīng)元要求的培養(yǎng)方法和營養(yǎng)條件均較為特殊。二、實驗步驟1.無菌條件下,從懷孕18天的SD大鼠腹
煙霧吸入誘發(fā)急性呼吸窘迫綜合征大動物模型2021/11/25
背景:急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)是多因素的,可由膿毒癥、創(chuàng)傷或肺炎等原發(fā)性疾病引起。它是危重病人死亡的主要原因之一,據(jù)報道死亡率高達45%。本研究的重點是建立煙霧吸入誘導ARDS的大型動物模型,以期為科學界提供可靠、可重復的孤立性毒性吸入損傷誘導的ARDS大型動物模型。方法:全身麻醉下在超聲引導下放置頸動脈、肺動脈和股動脈導管后,動物(n=21)暴露于煙霧中1至2小時。在整個過程中監(jiān)測外周血氧飽和度(SpO2)、生命體征和呼吸參數(shù)。在煙霧暴露之前、期間和之后采集胸部x光片、頸動脈、股動脈和肺
二甲雙胍、白藜蘆醇和雷帕霉素抑制小鼠肝臟蛋白質(zhì)組的營養(yǎng)性重編程2021/11/25
澳大利亞悉尼大學StephenJ.Simpson、DavidG.LeCouteur等研究人員合作發(fā)現(xiàn),二甲雙胍、白藜蘆醇和雷帕霉素抑制小鼠肝臟蛋白質(zhì)組的營養(yǎng)性重編程。該項研究成果于2021年11月11日在線發(fā)表在《細胞—代謝》雜志上。研究人類通過使用營養(yǎng)幾何框架來揭示了飲食和藥物對小鼠肝臟蛋白質(zhì)組的互動和比較效應,這些飲食處理在宏量營養(yǎng)素比例、能量密度和藥物處理(二甲雙胍、雷帕霉素、白藜蘆醇)方面有所不同。飲食能量和剪接體之間有強烈的負相關(guān),飲食蛋白質(zhì)和線粒體之間有強烈的正相關(guān),在高蛋白質(zhì)攝入時
倫理審查與科學無關(guān)嗎2021/11/10
在本號前文《動物實驗為何要開展倫理審查》中曾提到“在科學界,部分動物實驗的計劃制定者和實施者也存在著否定、不接受或不關(guān)注科學研究與動物實驗倫理之間存在關(guān)聯(lián)的事實”。那么動物實驗的倫理審查與科學或者科學實驗結(jié)果真的不相干嗎?答案顯然是否定的。我們都知道實驗動物是生命科學和醫(yī)學研究領(lǐng)域內(nèi)除了設(shè)備、信息和試劑外的另一個基本要素。隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展,科學家們很容易獲得高精尖的儀器設(shè)備、高精純的化學試劑和相關(guān)研究領(lǐng)域的情報信息。遺憾的是,科學家們在實際工作中,往往非常重視設(shè)備、信息和試劑這三個要素,也舍得
冬凌草甲素通過調(diào)控UBC9表達對肝星狀細胞增殖、凋亡的影響2021/11/10
目的探討冬凌草甲素對肝星狀細胞增殖、凋亡的影響和分子機制。方法采用不同濃度的冬凌草甲素干預肝星狀細胞(HSC-T6)48h。分別采用噻唑藍(MTT)實驗、流式細胞術(shù)檢測HSC-T6細胞增殖和凋亡變化。采用實時熒光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白質(zhì)印記(Westemblot)檢測泛素結(jié)合酶9(UBC9)表達變化。轉(zhuǎn)染UBC9小干擾RNA(si-UBC9)下調(diào)HSC-T6細胞中UBC9表達水平,采用上述方法檢測細胞增殖、凋亡變化。結(jié)果冬凌草甲素干預后,HSC-T6細胞增殖抑制率、凋亡率顯著升高,U
槲皮素對鎘致小鼠肝臟脂質(zhì)代謝紊亂模型的保護效應2021/11/10
目的探究槲皮素對鎘致小鼠肝損傷的保護效應及機制。方法C57BL/6J小鼠分為對照組、鎘組(灌胃氯化鎘)、槲皮素組(灌胃槲皮素)、鎘與槲皮素共處理組(灌胃氯化鎘+槲皮素)。給藥結(jié)束后,測定小鼠體質(zhì)量、血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性及血清與肝組織中總膽固醇(TC)和三酰甘油(TG)含量;HE染色觀察肝組織病理學變化,油紅O染色觀察肝組織脂滴變化;免疫印跡法檢測脂質(zhì)合成關(guān)鍵酶脂肪酸合成酶(FAS)與分解關(guān)鍵酶脂蛋白脂酶(LPL)變化。結(jié)果與對照組相比,鎘染毒小鼠體質(zhì)量顯著下降(P
小鼠脊髓損傷打擊模型精細行為的比較研究2021/11/10
目的探討脊髓損傷小鼠除運動功能障礙外,在自主運動、探索行為和自我照顧行為等家籠(homecage)內(nèi)精細行為方面的異常表現(xiàn)。方法8周齡雌性C57BL/6小鼠10只,接受T10脊髓打擊造模。另選11只小鼠為假手術(shù)組。術(shù)后1~5周,每日固定時間將小鼠置于家籠中記錄其精細行為,使用HomeCageScan軟件分析動物32種日常行為所占時間百分比。結(jié)果與假手術(shù)組動物相比,早期脊髓損傷小鼠的探索行為、自主運動和自我照顧行為中多數(shù)行為活動均存在顯著異常(P<0.01),部分行為在損傷后1~5周出現(xiàn)恢復。脊髓
哮喘模型的幾種造模方法2021/01/15
1.小鼠過敏性哮喘模型BALB/c小鼠于第0天和第14天分別腹腔注射0.1mL/只OVA液(0.2mg/mL)和DBP溶液(0.5mg/kg),第21~23天連續(xù)3天以0.5%的OVA溶液霧化激發(fā),每天于上午下午固定時間霧化2次,每次20min。霧化過程中觀察小鼠一般行為變化,后一次霧化結(jié)束后24小時,小鼠摘眼球取血,取支氣管肺泡灌洗液(BronchialAlveolarLavage,BALF)及肺組織。2.枸櫞酸誘發(fā)豚鼠咳嗽實驗取體重200-260g豚鼠,雌雄各半,置于500mL的觀察室內(nèi),以
類風濕關(guān)節(jié)炎模型幾種方法2021/01/15
(一)佐劑誘導型(AA)AA早由Freund于20世紀50年代創(chuàng)立,又稱弗氏佐劑關(guān)節(jié)炎,介導溶劑分為*佐劑(CFA)和不*佐劑(IFA)。通常用CFA作介導劑,AA模型在T細胞相關(guān)致炎通路的藥物篩選上發(fā)揮著重要的作用。(二)膠原誘導型(CIA)CIA模型是由Trentham等于1977年*建立的實驗性關(guān)節(jié)炎動物模型。通過皮下注射Ⅱ型膠原和等量CFA的混合液來建造,來源于雞、小牛和大鼠的Ⅱ型膠原均能引起關(guān)節(jié)炎癥。CIA是MHC相關(guān)型,以T/B淋巴細胞介導的關(guān)節(jié)炎癥侵蝕為主要特征。(三)膠原抗體誘導
科研項目的設(shè)計方法2021/01/07
除了一些安全性評價動物實驗外,我們這里提到的大多數(shù)動物實驗都是整體科學研究計劃的一個重要組成部分,動物實驗往往是為了證明或演繹某一科研假說而采取的手段。要進行動物實驗的設(shè)計,我們有對一般科學實驗的整體設(shè)計進行簡單的論述。廣義來講,科學研究選題是由社會發(fā)展和人們生活水平?jīng)Q定的(如癌癥和心血管疾病的發(fā)生就和人們所處生活環(huán)境有很大的關(guān)系);狹義來講,科學研究的選題是由研究機構(gòu)目標和能力來決定,或由研究者興趣來決定。(一)科研假說的形成科研假說(hypothesis)是科研活動的靈魂,一個立論充分的假說
Western blot內(nèi)參蛋白的選用!2021/01/07
一、WesternBlot實驗為什么要用內(nèi)參?WesternBlot實驗結(jié)果進行內(nèi)參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達量的相對多少,前提條件是等量的組織細胞蛋白上樣,才有比較的基礎(chǔ),特別是表達量不高時,上樣量的的差別就很有可能影響結(jié)果的分析。因此,在WesternBlot試驗中,進行內(nèi)參的檢測,有以下兩點作用:1、校正蛋白質(zhì)定量、上樣過程中存在的誤差,實驗結(jié)果的準確性;2、使用內(nèi)參可以作為空白對照,檢測蛋白轉(zhuǎn)膜情況是否、整個WesternBlot顯色發(fā)光體系是否正常。二、你的內(nèi)參選對了嗎?作為內(nèi)參
ELASA檢測方法一2020/12/31
ELASA:用于檢測未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸
PAS染色方法2020/12/31
一、服務介紹PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應使呈現(xiàn)紫紅色。隨著醫(yī)學實驗技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應用的范圍更加廣泛,如用以證明與鑒別細胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些腫瘤的診斷等。二、實驗原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。PAS染色一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細胞內(nèi)的多糖
MTT和CCK8區(qū)別2020/12/24
MTT增殖曲線,基本上就是基礎(chǔ)的功能實驗了,養(yǎng)過細胞的你應該都會做。但是,要怎么樣才能省時省力呢?你也知道,如果用MTT的話,加入10ul的MTT后要等四個小時,在活細胞的線粒體中形成甲囋,然后在把培養(yǎng)基吸掉,再加上DMSO溶解,進行檢測。這個方法是常用的MTT方法,但是會有三個問題,*個是有的甲囋不容易溶解。還有一個問題就是,由于要讓DMSO充分溶解甲囋,所以會要混勻,就會產(chǎn)生泡沫,影響酶標儀讀值:第三個問題,就是在吸去培養(yǎng)基的時候,容易把甲囋也吸走,導致終讀值不準。當然也不是沒有辦法的,這篇
血清的保存2020/12/24
血清的保存應該注意以下幾點:(1)生物學實驗中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,預留體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已解凍的血清。生物學實驗中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量。補體參與反應有:細胞毒作
行為學-水迷宮2020/09/18
1.將水迷宮加入適當?shù)乃疁乜刂圃?5±1℃。2.實驗前把動物帶入實驗室中熟悉環(huán)境。3.設(shè)置軟件。4.一階段:(定位航行)將小鼠頭對著墻壁依次放入四個象限水迷宮進行實驗(所有小鼠需全部做完后換下一象限)。若動物在60s內(nèi)登上平臺區(qū)域,則錄像結(jié)束。若動物在60s內(nèi)未登上平臺區(qū)域,則用木棍指引大鼠游上平臺,并停留30s。每只小鼠每天訓練4次,訓練天數(shù)為4天。5.每只動物實驗結(jié)束后需用干毛巾擦拭,必要時需要使用電吹風吹干。6.二階段(空間探索):待一象限到第四象限全部做完后,將水迷宮中的平臺撤走,將
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