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深圳市安培生物科技有限公司
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大鼠胰腺移植模型制作2023/04/11
原理成功的胰腺移植能為糖尿病患者或試驗對象提供具有正常功能的胰腺組織,能生理性調節胰島素的分泌,維持正常血糖,阻止甚至逆轉糖尿病并發癥的發生、進展。目前建立的模型多是供胰的靜脈回流采用供體門靜脈與受體下腔靜脈端側吻合的體循環回流方式。材料與儀器供、受者大鼠鏈脲霉素10%的四氧嘧啶葡萄糖生理鹽水1%的戊吧比妥鈉乙-醚25UL肝素溶液無菌水顯微外科手術器械包手術顯微鏡眼科剪手術器械步驟一、供、受者大鼠的選擇根據不同的研究目的選擇不同的動物品系,在同種移植模型中,一般采用兩種純系健康大鼠,如Lewis
免疫組織化染色2023/04/10
材料與儀器新鮮組織二甲苯酒精H2O2抗原修復液枸櫞酸鈉緩沖液石蠟福爾馬林PBSDAB蘇木素樹膠丙酮打孔液檸檬酸鈉APES恒溫搖床高壓鍋塑料切片架耐溫玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰凍切片機載玻片步驟一.石蠟切片免疫組化染色實驗步驟:1.石蠟切片脫蠟至水:(石蠟切片染色前應置60℃1小時)。(1)二甲苯I、II,各10分鐘。(2)梯度酒精:100%,2分鐘®95%,2分鐘®80%,2分鐘®70%2分鐘。(3)蒸餾水洗:5分鐘,2次(置于搖床)。2.過氧化氫封閉內源性過氧化物酶:3%H2O2,室溫10分鐘
小鼠灌胃具體操作2023/04/07
小鼠灌胃方法比較簡單,需要關注的只有兩點:一是要保持小鼠的頭部和頸部成一直線,方便灌胃針頭進入,二是動作要輕柔,從口角進入,防止損失食道。做的多了自然就熟練了。具體操作過程如下:1.準備灌胃針頭。一般可以從市場上面買到,實在沒有的話,可以用12號的針頭,剪去針尖,用砂紙將頭端磨平,也可以用。但是買的灌胃針頭的頭端用錫或者適宜的方法處理了針頭的銳口,自己用砂紙不可能將所有的銳口都磨掉,用這樣的針頭灌胃,損失小鼠食道的可能性比較大。2.抓住小鼠,使其頭、頸和身體呈一直線。抓小鼠的動作很簡單,左手的小
MAPK/ERK信號通路圖及簡介2023/04/07
MAPK,絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinases,MAPKs)是細胞內的一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶。研究證實,MAPKs信號轉導通路存在于大多數細胞內,在將細胞外刺激信號轉導至細胞及其核內,并引起細胞生物學反應(如細胞增殖、分化、轉化及凋亡等)的過程中具有至關重要的作用。研究表明,MAPKs信號轉導通路在細胞內具有生物進化的高度保守性,在低等原核細胞和高等哺乳類細胞內,目前均已發現存在著多條并行的MAPKs信號通路,不同的細胞外刺激可使用不同的MAPK
怎么處理植物組織培養過程中出現的各種污染2023/04/07
1.培養基的配制注意事項植物組織培養經常用到MS培養基,包含十幾種化合物。因為有些化合物相遇會發生化學反應產生沉淀,影響培養基的營養成分,準備MS培養基需要配制多種高倍母液。且配制母液時,尤其涉及大量元素的母液時,一定要等一種成分溶解之后,再緩慢的添加另一種成分,切記「一鍋煮」,即不能將各種化合物一齊添加進去。可選用MS培養基基鹽在自行加入蔗糖和瓊脂配制MS培養基,既經濟,更高效。2.滅菌后培養基不凝膠或者凝膠偏軟植物凝膠、瓊脂都對酸性條件敏感,pH值低于5很難成膠或凝膠偏軟,切記高壓滅菌前調節
新生大鼠心臟細胞的分離和培養實驗2023/04/07
材料與儀器SpragueDawley幼鼠胰酶液乙醇攪拌臺燒杯步驟組織消化和分離細胞1.在細胞操作間內,放一個加熱攪拌臺,上放一個裝有100ml滅菌水的容量600ml的燒杯,加熱至37℃。2.準備胰酶液。用水浴或溫箱使胰酶液溫度保持在37℃。3.做一個冰臺:將一只平皿裝滿冰后倒置即可,70%乙醇擦拭平皿后放進操作臺。取3個60mm的一次性組織培養用平皿,加入5ml鹽水A,標記上1,2,3放進操作臺的冰臺上。4.取一只干凈加蓋的燒杯,內放一塊Metofane飽和的紗布,把0~1日齡的SpragueD
神經組織染色實驗-神經尼氏體染色2023/04/06
原理神經元細胞核周含有尼氏小體,在一定條件影響下或神經元受到損傷時,尼氏小體可減少或消失。常用olszwski法能夠較好地顯示尼氏小體。材料與儀器石蠟組織切片焦油紫乙酸鈉蒸餾水冰醋酸二甲苯乙醇樹膠步驟焦油紫染色液:焦油紫1g,乙酸鈉2.2g,蒸餾水97ml,冰醋酸3ml。1.石蠟組織切片6~8μm,常規脫蠟至水。2.蒸餾水洗1min。3.焦油紫染色液浸染3h。4.直接用95%乙醇液迅速分化,鏡下觀察至尼氏小體呈紫色,其他組織無色為止。5.無水乙醇迅速脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。注意事項1.焦
血液運輸管道——血管的生理機制2023/03/17
19世紀法國名醫卡薩尼斯說過一句話:“人與動脈同壽”,也有人形象的把血管比作“生命的蠟燭”,這些都說明了人類的壽命與血管的健康有極其密切的關系。隨著飲食結構和生活方式的改變及社會的老齡化,動脈硬化導致的血管閉塞性疾病的發病率日趨增多,嚴重威脅人類的生命健康,已成為人類的第一殺手.人體血液的功能主要有以下幾點:1.運輸功能機體所需的各種營養物質和機體在代謝過程中所產生的各種廢物都是依靠血液的流動來運輸的。2.調節功能機體要維持內外環境的穩定性,都要通過血液的傳遞來調節。3.防御功能血液中的某種成分
H1人胚胎干細胞培養常見問題2023/02/24
疑難解答?是否還需要往H1細胞專用培養基中補充或添加成分?不需要。H1細胞培養基中各個成分的質量和濃度都經過了優化實驗,支持人ESC/iPSC的長期培養,無需再自行添加。?培養基中有沉淀狀物質是否是質量問題?添加劑在解凍過程中,若有少量沉淀析出,屬于正常現象,不影響使用,請充分混勻后與基礎培養基混合。但添加劑不能在37℃解凍,否則會析出大量沉淀,影響培養基的效價。如果培養基中出現大量沉淀,請不要使用。?是否能在37℃反復水浴H1細胞專用培養基?不能。頻繁地在4℃和37℃之間轉換會導致H1細胞專用
H1人胚胎干細胞的培養2023/02/24
H1人胚胎干細胞的培養1.試劑和材料H1細胞專用培養基試劑成分規格數量儲存條件H1細胞基礎培養基500mL1瓶2-8℃H1細胞培養基添加劑20mL1支-20℃所需的其它試劑和材料產品規格貨號Y276321mgH1Med-iCell-CA005Matrigel5mLH1Med-iCell-CA004H1細胞消化液500mLH1Med-iCell-CA003ES細胞專用凍存液100mLiCell-0700-T另需細胞培養皿/瓶/板,15mL離心管和移液管等細胞培養耗材2.培養流程2.1試劑的制備2.
成功轉染脂肪間充質干細胞(ADMSCs)(IF6.684)文章分享2023/02/24
zetalifeAdvancedDNARNA轉染試劑轉染脂肪間充質干細胞(ADMSCs)(IF6.684)文章分享zetalife轉染脂肪間充質干細胞(ADMSCs)(IF6.684)文章分享編輯一、轉染犬/狗脂肪間充質干細胞(ADMSCs)siRNA基因沉默簡述熒光素標記的siRNA(小干擾RNA)每個基因設計有三個siRNA,使用美國ZetaLife公司AdvancedDNARNA轉染試劑(ZetaLife,MenloPark,CA,UnitedStates)用siRNA轉染犬/狗脂肪間充質
植物原生質體的制備2023/02/21
原理去掉植物細胞壁的方法可以是機械的人工操作,也可以利用酶解法。較早利用機械法制備原生質體的首-推Klercker(1892),直到1960年英國科學家Cocking才第一次用酶法大量制備原生質體。本實驗以植物的葉肉組織為材料,利用纖維素酶和果膠酶來消化細胞壁,分離細胞。材料與儀器油菜或菠菜或煙草氯化鈣蒸餾水2蔗糖酶解液顯微鏡離心機離心管剪刀鑷子吸管培養皿載玻片蓋玻片步驟1、取材根據實驗目的和條件選取不同的材料2、分離原生質體(1)撕葉下表皮(2)酶解將撕去下表皮的葉片剪成小塊,放在盛有5mL酶
液泡的分離2023/01/30
材料與儀器紫洋蔥紫蘿卜葉蔗糖溶液小鑷子步驟一、材料與設備紫洋蔥、紫蘿卜葉、0.5M蔗糖溶液、小鑷子二、實驗步驟撕取紫色洋蔥或蘿卜葉片表皮,置于載玻片上,稍滴加清水后蓋上蓋玻片,于顯微鏡下觀察制片中的細胞,若細胞其中有一個完整無缺的、含花青素的玫瑰紫色液泡,則用濾紙條吸引液體的方法連續滴加0.5M蔗糖溶液,使細胞發生強烈的質壁分離,隨后用鋒利刀片在細胞縱軸垂直的面上截斷,在顯微鏡下選擇已剖開但原生質未受損傷的細胞處,再滴加少許蔗溏液,用小鑷子輕輕壓蓋玻片,可見原生質破裂或脫離,而含有花青素的液泡被
光合強度的測定2023/01/30
原理改良半葉法是將植物對稱葉片的一部分遮光或取下置于暗處,另一部分則留在光下進行光合作用,過一定時間后,在這兩部分葉片的對應部位取同等面積,分別烘干稱重,因為對稱葉片的兩對應部位的等面積的干重原來相等,光照后葉片重量超過暗中的葉重、超過部分即為光合作用產物的重量,并通過一定的計算可得到光合作用強度。材料與儀器步驟二、儀器藥品剪刀分析天平稱量皿烘箱刀片金屬模板紗布錫紙三氯-乙酸三、實驗步驟1.選擇測定樣品在田間選擇有代表性的植株葉片(如葉片在植株上的部位、葉齡、受光條件等)20片,用小紙牌編號。2
根系活力的測定2023/01/30
原理根據植物礦質吸收的理論,認為植物對溶質的最初吸收具有吸附的特性,并假定這時在根系表面均勻地復蓋了一層吸附物質的單分子層。因此能根據根系的某種物質的吸附量來測定根的吸收面積。常用甲烯藍作為被吸附物質,它的被吸附量可以根據溶液濃度的變化用比色法準確地測出。已知1毫克甲烯藍成單分子層時占用1.1平方米的面積。據此即可求出根系的總吸收面積。當根系在甲烯藍溶液中已達到吸附飽和而仍留在溶液中時,根系的活躍部分能把原來的物質吸收到細胞中去,因而繼續吸附甲烯藍。而后根據吸附量求出活躍吸收面積,可作為根系活力
淀粉酶活性的測定2023/01/30
原理α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐熱,在高溫下易鈍化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下則發生鈍化,通常提取液同時有兩種淀粉酶存在,測定時,可根據它們的特性分別加以處理,鈍化其中之一,即可測出另一酶的活性。將提取液加熱到70℃維持15分鐘以鈍化β-淀粉酶,便可測定α-淀粉酶的活性。或者將提取液用pH3.6之醋酸在0℃加以處理,鈍化α-淀粉酶的活性,以測出β-淀粉酶的活性。淀粉酶水解淀粉生成的麥芽糖,可用3,5-二硝基水楊酸試劑測定。由于麥芽糖能將后者還原生成3-氨基-
還原糖和總糖的測定2023/01/30
原理各種單糖和麥芽糖是還原糖,蔗糖和淀粉是非還原糖。利用溶解度不同,可將植物樣品中的單糖、雙糖和多糖分別提取出來,再用酸水解法使沒有還原性的雙糖和多糖徹-底水解成有還原性的單糖。在堿性條件下,還原糖將3,5-二硝基水楊酸還原為3-氨基-5-硝基水楊酸(棕紅色物質),還原糖則被氧化成糖酸及其它產物,在一定范圍內,還原糖的量與棕紅色物質深淺的程度呈一定的比例關系,在540nm波長下測定棕紅色物質的消光值,查對標準曲線并計算,便可分別求出樣品中還原糖和總糖的含量。多糖水解時,在單糖殘基上加了一分子水,
酶的激活和抑制實驗2023/01/29
原理酶的活力常受某些物質的影響,有些物質能使酶的活力增加,稱為激活劑;有些物質能使酶的活性降低,稱為抑制劑。值得注意的是激活劑和抑制劑不是絕對的,有些物質在低濃度時為某種酶的激活劑,而在高濃度時則為該酶的抑制劑。例如,氯化納達到1/3飽和度時就可抑制唾液淀粉酶的活力。材料與儀器步驟1.儀器:(1)試管:3支;(2)試管架;(3)漏斗;(4)燒杯;(5)刻度吸管:1毫升×4,5毫升×1;(6)恒溫水浴;(7)10毫升×1四、操作步驟:取3支試管,按下表操作以上就是本期的內容,更多資訊,歡迎點擊安培
種子與幼苗的觀察2023/01/29
材料與儀器蠶豆菜豆豌豆花生蓖麻或油桐種子玉米小麥水稻果實;小麥水稻穎果切片;大豆菜豆花生豌豆蓖麻小麥水稻玉米的幼苗I-KI溶液1%番紅染液顯微鏡解剖鏡培養皿刀片鑷子解剖針載玻片蓋玻片擦鏡紙紗布步驟一、種子的結構與類型種子是種子植物的生殖器官,萌發后形成幼苗。1.菜豆、蠶豆、蓖麻等種子的形態結構可選用菜豆、蠶豆、大豆等種子作材料,于實驗前2-3d將種子浸泡于清水中,讓其充分吸脹與軟化,以利于種子的解剖觀察。(1)菜豆種子的形態結構(圖1、2):取一粒以浸泡脹的菜豆種子。可見種子呈腎型,種子外表有一
植物細胞分裂和植物分生組織2023/01/29
原理1.了解植物細胞分裂的三種方式;認識分生組織在植物體上的位置及其類型。2.掌握植物細胞有絲分裂和減數分裂各時期的特征;掌握分生組織的結構特點。材料與儀器洋蔥根尖鴨跖草大蒜苗永-久制片油菜莖尖新鮮莖段胡桃刺槐枝條小麥幼莖冰醋酸醋酸洋紅龍膽紫醋酸碘化鉀番紅水顯微鏡水杯剪刀培養皿燒杯指形管滴管載玻片蓋玻片吸水紙酒精燈刀片鑷子解剖針紗布毛筆步驟一、植物細胞分裂植物細胞在進行生長發育過程中,不斷地進行細胞分裂,增加細胞的數目。植物細胞分裂的方式有有絲分裂、無絲分裂、減數分裂三種,其中最-普-遍、最常見
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