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BY-1207 PC-12未分化細胞系

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PC-12未分化細胞系
PC-12未分化細胞系作為 PC-12 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞系的原始亞型,因保留最jie近腫瘤起源的未分化特征,在神經內分泌腫瘤發生機制與分化啟動研究中具有du特jia值,成為探究腫瘤細胞去分化表型及原始特性的關鍵實驗模型。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自 PC-12 細胞的未分化克隆株,經早期傳代純化獲得。細胞形態以圓形或類圓形為主,胞體小而致密,胞質內幾乎無嗜鉻顆粒,細胞核占比ji高,核仁顯著,核質比為 PC-12 高分化細胞系的 3.2 倍。生長方式以懸浮生長為主,僅 20% 細胞輕微貼壁,傳代后 24 小時貼壁率僅 65%,明顯低于其他分化亞型。核心參數表現出原始性:倍增時間短至 36 小時,連續傳代 60 次后染色體核型極度不穩定(染色體數約 38-50 條);神經內分泌標志物如羥化酶(TH)、多巴胺 β- 羥化酶(DBH)表達量僅為高分化細胞系的 15%,免疫熒光陽性率不足 40%,但腫瘤干細胞標志物 CD133、Nanog 表達量分別是低分化細胞系的 2.1 倍和 1.8 倍;無微生物污染,細胞純度達 92%,保障實驗結果的特異性。
科研應用價值:在腫瘤發生機制研究中,PC-12 未分化細胞系在體外可形成懸浮球狀體,球體形成率是高分化細胞系的 8.7 倍,且具有無限傳代能力,能模擬腫瘤干細胞的自我更新特性,為解析神經內分泌腫瘤的起源細胞特性提供理想模型。分化啟動機制研究方面,該細胞經聯合誘導(NGF + 維甲酸)后,7 天內神經突起形成率從 12% 提升至 68%,神經標志物表達量增加 4.3 倍,可動態模擬未分化細胞向成熟細胞的轉化過程,助力分化啟動信號通路的探究。在藥物研發領域,該細胞對hua療藥物敏感性極低,相同濃度藥物處理后凋亡率僅為高分化細胞系的 22%,ABC 轉運蛋白家族表達量升高 5.6 倍,適用于篩選逆轉腫瘤原始耐藥性的靶向藥物。此外,通過與不同分化程度 PC-12 細胞系的基因芯片對比,已鑒定出 89 個特異性表達的未分化相關基因,為尋找腫瘤去分化的驅動因子提供重要線索。
培養與保存規范:推薦使用含 20% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養基(不含馬血清),添加 1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度,需每日輕輕搖晃培養瓶以維持懸浮狀態。培養基需每 2 天更換一次,更換時保留 50% 舊培養基以維持細胞因子微環境。傳代時無需消化處理,直接收集懸浮細胞,按 1:5-1:8 比例稀釋傳代,每 2-3 天傳代一次,維持細胞密度在 2×10?-8×10?個 /ml。凍存液配方為基礎培養基 + 20% DMSO+25% 胎牛血清,經程序降溫后液氮保存,復蘇時存活率約 68%,需連續培養 5 代后恢復穩定生長狀態。誘導分化實驗需采用高濃度聯合誘導方案(100ng/ml NGF+1μM 維甲酸),誘導周期延長至 14 天,每日觀察細胞形態從圓形向梭形的轉化過程。該細胞系腫瘤原始特性強,操作時需嚴格執行無菌操作,避免交叉污染,僅限科研使用。
PC-12 未分化細胞系以其ji端的未分化表型、活躍的增殖能力及強大的干性特征,為神經內分泌腫瘤的發生發展研究提供了原始細胞模型,與不同分化程度亞型的對比研究,有助于揭示腫瘤細胞分化層級的演變規律,為開發針對腫瘤起始細胞的靶向治療策略提供實驗依據。

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