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BY-1205 PC-12低分化細胞系

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PC-12低分化細胞系
PC-12低分化細胞系作為 PC-12 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞系的亞型,因保留更強的腫瘤原始特性,在腫瘤惡性進展與分化調控研究中具有特殊價值,成為探究神經內分泌腫瘤低分化機制及耐藥性的關鍵實驗模型。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自 PC-12 細胞的低分化克隆株,經長期傳代篩選獲得。細胞形態以圓形或短梭形為主,胞體較小,胞質內嗜鉻顆粒數量僅為普通 PC-12 細胞的 30%,細胞核大而圓,核仁明顯,核質比顯著升高。生長方式為半貼壁生長,約 30% 細胞呈懸浮狀態,傳代后 24 小時貼壁率約 78%,顯著低于普通亞型。核心參數表現出du特性:倍增時間縮短至 48 小時,連續傳代 60 次后染色體核型更不穩定(染色體數約 41-47 條);神經內分泌標志物如羥化酶(TH)、多巴胺 β- 羥化酶(DBH)表達量較普通 PC-12 細胞降低 52%,免疫熒光陽性率僅 68%,但腫瘤干細胞標志物 CD133 表達量升高 2.3 倍;無微生物污染,細胞純度達 93%,保障實驗特異性。
科研應用價值:在分化調控研究中,PC-12 低分化細胞對神經生長因子(NGF)誘導反應遲鈍,相同濃度 NGF 處理 72 小時后,神經元突起形成率僅為普通 PC-12 細胞的 25%,微管相關蛋白 2(MAP2)表達量僅增加 1.2 倍,可模擬腫瘤細胞分化受阻狀態,為解析分化抑制的分子機制提供理想模型。腫瘤惡性表型研究方面,該細胞體外侵襲能力顯著增強,Transwell 實驗中穿膜細胞數是普通亞型的 3.1 倍,裸鼠成瘤潛伏期縮短至 14 天,腫瘤體積增長速度提高 2.8 倍,能很好地模擬低分化神經內分泌腫瘤的侵襲轉移特性。耐藥機制研究領域,該細胞對多種抗腫瘤藥物敏感性降低,經相同濃度藥物處理后凋亡率僅為普通 PC-12 細胞的 40%,ABC 轉運蛋白家族表達量升高 2.7 倍,適用于篩選逆轉耐藥的靶向藥物。此外,通過對比該細胞與普通 PC-12 細胞的基因表達譜差異,已發現 124 個差異表達基因,為尋找腫瘤低分化相關分子靶點提供重要線索。
培養與保存規范:推薦使用含 15% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養基(取消馬血清添加),添加 1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度。培養基需每日更換以清除懸浮死細胞,傳代時采用含 EDTA 的消化液延長處理至 8-10 分鐘,傳代比例提高至 1:4-1:5,每 2-3 天傳代一次,維持細胞密度在 1×10?-5×10?個 /ml。凍存液配方為基礎培養基 + 15% DMSO+20% 胎牛血清,經程序降溫后液氮保存,復蘇時存活率約 75%,需連續培養 3 代后恢復穩定生長狀態。誘導分化實驗需提高 NGF 濃度至 100ng/ml,誘導時間延長至 7 天,每日觀察細胞形態變化。該細胞系腫瘤特性強,操作時需嚴格遵循生物安全規范,僅限科研使用。
PC-12 低分化細胞系以其顯著的去分化特征、活躍的增殖能力及耐藥表型,為神經內分泌腫瘤的惡性程度分級研究提供了du特視角,其與普通亞型的對比研究,有助于揭示腫瘤分化程度與臨床預后的關聯機制,為開發針對低分化腫瘤的治療策略提供實驗依據。

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