HL-7702[L02]人肝細(xì)胞系
HL-7702[L02]人肝細(xì)胞系源于健康人體正常肝細(xì)胞,憑借保留的多種生理功能,成為肝臟研究領(lǐng)域不ke或缺的細(xì)胞模型。光鏡下,細(xì)胞呈多邊形或不規(guī)則形,以典型的上皮樣形態(tài)貼壁生長(zhǎng),緊密排列形成類(lèi)似肝板的結(jié)構(gòu),宛如微觀肝臟組織的縮影。細(xì)胞胞質(zhì)豐富,經(jīng) HE 染色后呈嗜酸性,內(nèi)部線粒體短棒狀且數(shù)量眾多,為細(xì)胞高強(qiáng)度代謝供能;粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)布滿核糖體,活躍參與蛋白質(zhì)合成;滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)則承擔(dān)脂質(zhì)代謝與藥物解毒重任;高爾基體與溶酶體協(xié)同,保障蛋白質(zhì)運(yùn)輸、修飾與降解的精準(zhǔn)進(jìn)行。細(xì)胞核圓潤(rùn)居于中央,核仁清晰,彰顯細(xì)胞旺盛的生命活力。
在生物學(xué)特性上,HL-7702 [L02] 細(xì)胞高度保留肝細(xì)胞核心功能。代謝層面,其細(xì)胞色素 P450 酶系活性顯著,如 CYP1A2、CYP2E1 能對(duì) 80% 以上臨床藥物進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化,科研人員借助該細(xì)胞系,成功解析出抗抑郁藥氟xi汀的 Ⅱ 相代謝通路,為藥物相互作用研究提供依據(jù)。合成功能方面,細(xì)胞持續(xù)合成白蛋白、凝xue因子等血漿蛋白,且轉(zhuǎn)錄因子 HNF1α、HNF4α 通過(guò)表觀遺傳調(diào)控,動(dòng)態(tài)維持蛋白合成平衡。細(xì)胞具備一定再生潛能,在機(jī)械損傷或生長(zhǎng)因子刺激下,Hippo 通路關(guān)鍵蛋白 YAP 磷酸化水平下降,入核激活下游基因,驅(qū)動(dòng)細(xì)胞進(jìn)入增殖周期,但長(zhǎng)期傳代后再生能力會(huì)下降。面對(duì)乙醇、黃曲霉毒素 B1 等肝毒性物質(zhì),細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平驟升,觸發(fā) JNK 信號(hào)通路介導(dǎo)的凋亡程序,可精準(zhǔn)模擬肝損傷病理過(guò)程。
培養(yǎng)該細(xì)胞系需精準(zhǔn)把控環(huán)境條件。以含 10% - 15% 特級(jí)胎牛血清的 RPMI 1640 為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,額外添加 1% 非必需氨基酸、1% 谷an酰胺增強(qiáng)細(xì)胞活力;雙抗體系配合 CO?培養(yǎng)箱,維持無(wú)菌微環(huán)境。細(xì)胞匯合度達(dá) 80% 時(shí),用含 EDTA 的 0.25% 胰dan白酶消化,輕柔吹打避免機(jī)械損傷,按 1:3 比例傳代。凍存時(shí)采用程序降溫法,先于 - 80℃過(guò)夜,再轉(zhuǎn)入液氮。日常通過(guò) CCK-8 法監(jiān)測(cè)細(xì)胞活力,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) CD13、EpCAM 等肝細(xì)胞標(biāo)志物,確保細(xì)胞特性穩(wěn)定。
在科研實(shí)踐中,HL-7702 [L02] 細(xì)胞系成果豐碩。在疾病建模領(lǐng)域,研究團(tuán)隊(duì)利用該細(xì)胞系構(gòu)建非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型,發(fā)現(xiàn) miR-122 通過(guò)靶向 PPARα 調(diào)控脂質(zhì)代謝,為 NASH 治療提供新靶點(diǎn)。藥物研發(fā)方面,新型降糖藥曲格列汀在此細(xì)胞系上完成肝毒性預(yù)實(shí)驗(yàn),其對(duì) CYP 酶活性無(wú)顯著影響,順利推進(jìn)至臨床試驗(yàn)階段。在再生醫(yī)學(xué)研究中,基于該細(xì)胞系篩選出的小分子化合物組合,可誘導(dǎo)細(xì)胞向肝干細(xì)胞樣細(xì)胞轉(zhuǎn)化,為肝臟疾病細(xì)胞治療開(kāi)辟新路徑。
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